Anti-Huntingtin Disease (HD/HTT) Antibody

polyQの数に応じて変動。ハンチンチンタンパク質（Htt）のpolyQ領域は高度に多型であり、正常集団では10～35リピート、ハンチントン病患者では120リピート以上に伸長している可能性があります。UniProt：P42858で報告された配列に基づく算出値：347.6 kDa。

ハンチンチン（UniProt P42858；別名：HDタンパク質、ハンチントン病タンパク質）は、ヒトHTT（別名：HD、IT15）遺伝子（Gene ID：3064）にコードされています。特定のタンパク質のミスフォールディングと自己凝集は、ハンチントン病（HD）、アルツハイマー病（AD）、パーキンソン病（PD）、筋萎縮性側索硬化症（AML）などのよく知られた神経変性疾患に共通する特徴です。異常なポリグルタミン（polyQ）反復配列または伸長は、タンパク質のミスフォールディングや神経変性を引き起こします。例えば、HDは、原因タンパク質であるハンチンチンの最初のエクソンコード配列（Httエクソン1）におけるpolyQの伸長によって引き起こされます。伸長したpolyQは、アミロイドと呼ばれるβシートに富む線維状凝集体の形成をもたらします。polyQ経路を含むがhttとは関連のない8つのタンパク質も、polyQの伸長時にタンパク質のミスフォールディングと神経変性を引き起こします。疾患を引き起こすアミロイドタンパク質の可溶性オリゴマーは（モノマーも）、毒性の高い種であることを示唆するエビデンスが増加しつつあります。HDでは、封入体（IB）と呼ばれる変異型htt（mHtt）の最終段階である非常に大きな凝集種の形成は、ニューロン全体に散在するモノマーまたは低分子オリゴマーmHttの毒性種を隔離するための対処反応であると考えられています。

66グルタミンの伸長を含むエクソン1コード配列に相当するN末端GSTタグヒトハンチンチン（Htt）フラグメント（GST-171-Q66；Miller, J., et al. (2011).Nat. Cell Biol. 7(12):925-934）。

抗polyQ疾患タンパク質 クローン3B5H10（カタログ番号MABN821）は、疾患に関連するpolyQタンパク質を特異的に検出するマウスモノクローナル抗体であり、電子顕微鏡法、免疫細胞染色、免疫組織染色、阻害試験、ウェスタンブロッティングで試験されています。

電子顕微鏡：この抗体は、トランスフェクトされたニューロン中の、97のpolyQ伸長を有する一過性に発現したハンチントン（Htt）N末端フラグメントを免疫染色しました。クローン3B5H10は、細胞質のHttを広範に標識し、細胞小器官のHttをほとんど染色せず、大型の封入体（IB）のHttを染色しませんでした（Miller, J., et al. (2011).Nat. Chem. Biol. 7(12):925-934）。

免疫細胞染色：この抗体は、疾患に関連するpolyQ伸長（Q46～Q138）を有するハンチントン（Htt）またはアタキシン-3を一過性に発現しているニューロンを免疫染色しましたが、Q17を有するHttまたはQ27を有するアタキシン-3を発現しているニューロンは免疫染色しませんでした。クローン3B5H10は、変異型Htt（mHtt）を広範に標識しましたが、大型の封入体（IB）の凝集したHttを染色しませんでした（Miller, J., et al. (2011).Nat. Chem. Biol. 7(12):925-934）。

免疫組織染色：この抗体は、マウスBACHD株（Q97を有する完全長mHtt）、R6/2株（約Q150を有するエクソン1フラグメント）、YAC-SCA3株（Q84を有する完全長mHtt）などの、疾患関連ヒト変異型ハンチントン（mHtt）タンパク質を発現しているトランスジェニックマウス由来の脳組織切片を免疫染色しました。クローン3B5H10は、mHttを広範に標識しましたが、90%ギ酸処理による強力な抗原賦活化を行わない限り、高度に凝集したHttを有する組織を染色できませんでした（Miller, J., et al. (2011).Nat. Chem. Biol. 7(12):925-934）。

阻害分析：この抗体は、原子間力顕微鏡（AFM）および動的光散乱（DLS）測定により、in vitroで変異型Htt（mHtt）エクソン1フラグメントとQ39またはQ53との凝集を妨げ、凝集前のmHttオリゴマーおよび線維を破壊してモノマーを生成しました（Miller, J., et al. (2011).Nat. Chem. Biol. 7(12):925-934）。

ウェスタンブロッティング：この抗体は、疾患に関連するpolyQ伸長（Q65～Q103）を有するハンチントン（Htt）、アンドロゲン受容体（AR）、アトロフィン構築物を検出しましたが、HEK293およびPC12細胞で外因性に発現されたQ19またはQ25を有する構築物は検出しませんでした。クローン3B5H10は、モノマーおよびおそらくは低分子のオリゴマーのmHtt N末端フラグメントを検出しましたが、大きなオリゴマーや高分子量凝集体は検出できませんでした（Miller, J., et al. (2011).Nat. Cell Biol. 7(12):925-934）。

クローン3B5H10の標的エピトープは、変異型ハンチンチンタンパク質（mHtt）のモノマーやおそらくは低分子のオリゴマーpolyQ種に採用される多く配座のいくつかに露出していますが、封入体（IB）などの高分子量の凝集形態では消失します。このエピトープは、神経変性を引き起こす他のpolyQ含有タンパク質の変異型にも存在し、その例としては、アンドロゲン受容体、アトロフィン、アタキシン-3などがあります（Miller, J., et al. (2011).Nat. Cell Biol. 7(12):925-934）。

フォーマット：精製

134Q-mtHTTおよび17Q-wtHTTリコンビナント・フラグメントのウェスタンブロッティングにより評価済み。

ウェスタンブロッティング：この抗体0.5 µg/mLは、134-グルタミン/Gln（134Q）伸長を有するエクソン1コードN末端ハンチントンフラグメントを検出しましたが、17Qを有する対応する正常（野生型）フラグメントは検出しませんでした。

濃度：ロットに固有のデータシートを参照してください。