세포 이동 및 침입 분석
섹션 개요
그림 1.종양 전이는 암세포의 부착, 세포 이동, 주변 조직 및 혈관계로의 침입을 포함하는 다단계 과정입니다.
그림 2.보이든 챔버 분석 프로토콜. 세포는 막 아래에 화학 유인제가 추가된 반투과성 막 세포 배양 인서트에 시드된 세포 단층 또는 ECM 단백질 혼합물을 통해 이동하도록 허용됩니다. 그런 다음 이동한 세포를 Calcein-AM 또는 CyQUANT GR 염료와 같은 DNA 염료로 염색하여 정량화할 수 있습니다.
세포 이동 및 침입 키트
Millipore의 QCM™ 세포 이동 및 침입 분석은 세포 이동, 접착 및 침입에 대한 다양한 요인의 정량적 측정을 위한 빠르고 효율적인 시스템을 제공하며, 여기에는 약리학적 약제 스크리닝, 인테그린, 화학 유인제 또는 세포 이동을 담당하는 기타 접착 수용체의 평가가 포함됩니다. 이 키트는 10년 이상 연구자들에게 일관된 결과를 제공해 왔으며, 4000편 이상의 출판물에 게재되어 있습니다.
세포 이동 분석:
화학 농도 구배(케모택시스) 또는 ECM 단백질 구배(햅토택시스)를 향한 세포 이동을 편리하고 민감하게 정량화할 수 있습니다.
세포 침입 분석: 기저막 ECM 단백질 또는 내피 세포와 같은 세포 층을 통한 세포 침입을 편리하고 민감하게 정량화할 수 있습니다.
세포에 적합한 기공 크기 선택 방법:
- 3 μm 기공 크기는 백혈구 또는 림프구 이동에 적합합니다.
- 5 μm 기공 크기는 섬유아세포 또는 암세포의 하위 집합인 NIH-3T3 및 MDA-MAB 231 세포에 적합합니다. 단핵구 및 대식세포에도 적합합니다.
- 8 μm 기공 크기는 대부분의 세포 유형에 적합합니다. 이 기공 크기는 대부분의 상피세포와 섬유아세포에 최적의 이동을 지원합니다. 참고 - 8μm 기공 크기는 림프구 이동 실험에는 적합하지 않습니다.
세포 이동 분석
미세유체 마이그레이션 장치
Millicell® µ-Migration Assay Kit는 기존 멀티웰 이동 분석의 한계를 극복합니다. µ-Migration 슬라이드의 혁신적인 디자인은 일관되게 선형적이고 48시간 이상 지속되는 안정적인 확산 생성 농도 구배를 촉진합니다. 유리와 유사한 광학 특성을 지닌 플라스틱으로 제작된 µ-Migration Slide는 비디오 현미경 분석용으로 특별히 설계되었습니다. 특정 시간 간격으로 관찰 영역의 이미지를 획득할 수 있어 세포 이동을 실시간으로 모니터링하고 정량적으로 측정할 수 있습니다.
그림 3.HT1080 세포의 살아있는 세포 이동. 혈청 농도(0% 또는 10%)가 콜라겐 코팅 표면에서 HT1080 세포의 이동 성향에 미치는 영향. 결과는 대부분의 세포가 10% FCS 구배(검은색)로 이동하는 것을 보여줍니다.
인비트로 스크래치 분석
스크래치 분석은 세포 이동4 연구에 널리 사용되는 방법입니다. 그러나 이 기법을 확장하는 것이 쉽지 않아 상처 회복을 매개하는 분자적 사건에 대한 생화학적 분석이 어려웠습니다. Cell Comb™ 스크래치 분석은 더 높은 처리량으로 여러 스크래치 상처를 생성할 수 있는 간단한 도구의 필요성을 해결합니다.
그림 4.CellComb 스크래치 분석법을 사용하여 NIH3T3 세포의 단층을 한 방향(왼쪽) 또는 양방향(오른쪽) 패턴으로 긁거나 상처를 입혔습니다. 시간이 지남에 따라 이동하는 세포가 긁힌 부분을 채우고 간단한 세포 계수를 사용하여 정량화합니다. 스크래치 이동 분석법을 사용하여 이동하는 세포에 대한 라이브 세포 이미징도 가능합니다.