DIGノーザンスターターキット

DIGノーザンスターターキットは初心者のDIGシステムユーザーのため設計されたものです。含まれる試薬はノーザンブロッティングにおいて成功し、再現性のある結果を与えることが証明されています。また、さらに便利な形態の標準的DIGシステム製品が同梱されています（たとえばCDP Star, ready-to-use）。ユーザーはDIGシステムを用いて少ない回数の反応でしっかりとした基礎を作ることができます。そうすれば標準的なパックサイズは「卒業」になります。理想的な成功を得るには、本キットをDIG WashおよびBlockバッファーセットとともにご使用ください。このキットは、一本鎖のDIG標識RNAプローブの生成および化学発光検出のために用いられます。標識プローブはin vitro転写法を用いて合成されます。

メルクは、グリーン・ケミストリーの12原則の1つ以上に則った、より環境に配慮した製品（グリーン代替品）をお客様にお届けできるよう最善の努力をします。この製品はさらに安全な化学品として設計されます。  DIGシステムは、核酸のラベリングと検出に放射能を使用することに代わる高感度で費用対効果の高い手段として確立されました。DIGシステムの汎用性を証明する入手可能な出版物は数多くあります。そのため、放射性ラベリングの使用は、もはやハイブリダイゼーションのDNAラベリングの唯一の選択肢ではありません。

DIGノーザンスターターキットは同梱の化学発光検出試薬と併せて、ノーザンブロッティング法に使用されるDIG標識RNAプローブを生成することができます。線状化したDNAをテンプレートとして、SP6、T3またはT7 RNAポリメラーゼを用いてDIG-11-UTPをRNA転写産物に取り込むために用いられます。標識後、DIG標識プローブは直ちにハイブリダイゼーションに使用できます。ハイブリダイゼーションにはDIG Easy Hybのご使用が便利です。DIG Easy Hyb顆粒は、64 mLのDEPC処理（RNアーゼフリー）水を直接ボトルに加えることによって簡単に溶解することができます（一度溶解させれば、DIG Easy Hybは室温で1ヵ月間安定です）。ハイブリダイゼーション後、DIG標識RNAプローブを含むハイブリダイゼーション溶液は将来の再利用のため-15～-25℃で保存することができます（最長1年間）。

DIGノーザンスターターキットはB型肝炎ウイルスRNA、カンキツレプロシスウイルス細胞質タイプ2（CiLV-C2）RNAの解析のためノーザンブロットハイブリダイゼーションで使用されてきました。

1キット11反応分。
1キットは最大10標識反応と10ブロットの検出（10 x 10 cm²のブロット）、1 µgのDNAからそれぞれの反応でおよそ20 µgの標識RNAが得られます。

感度と特異性1 µgの線状化線状化したテンプレートDNAを用いれば、1時間以内の標識反応で通常20 µgの新たに合成されたDIG標識RNAが得られます。DIG標識RNAプローブを用いればドットブロット法で、0.1 pgの対応するDNAまたはRNAを検出することができます。総RNA量0.1 µg中の希少なmRNAを検出することができます。

標準溶液：注意：滅菌済みの、RNアーゼフリーの溶液と器具を使用してください。
測定時間：9時間30分
試料となる物質：

• 線状化プラスミド、適切なRNAポリメラーゼのプロモーター配列（SP6, T3, T7）を含むもの。
• 特別に用意されたPCR産物標準溶液：注意：滅菌済みの、RNアーゼフリーの溶液と器具を使用してください。

注意：転写領域の長さは200～1,000 bpの範囲内としてください。RNアーゼの混入を避けるため、DNAはフェノール処理が必須です。

ライフサイエンス研究のみに使用できます。診断用には使用できません。