コラゲナーゼ Clostridium histolyticum由来

Clostridium histolyticumは、コラゲナーゼを生産する病原性のクロストリジウム属です。本製品は、コラゲナーゼ、非特異的プロテアーゼ、およびクロストリパインを含む酵素の混合物です。

コラゲナーゼは以下のことに使用されることがあります：

• 終端糖化産物（AGE）の研究のための動脈組織の調製
• ヒト腫瘍、マウス腎臓、ヒト脳、肺上皮、および多くの他の組織の非凝集化のための、他のプロテアーゼとの使用。
• 肝臓および腎臓の灌流実験、膵臓の消化、非実質性肝細胞の分離
• ラット肝臓からの生存肝細胞の調製、およびラット脂肪組織からの脂肪細胞の分離

コラゲナーゼは、酵素1モルあたり4グラムのカルシウム原子によって活性化されます。本酵素は、エチレングリコール-ビス（β-アミノエチルエーテル） - N, N, N',N'-四酢酸、β-メルカプトエタノール、グルタチオン、チオグリコール酸、および8-ヒドロキシキノリンによって阻害されます。コラゲナーゼおよび中性プロテアーゼは、組織からの細胞の効果的な遊離において重要な役割を担っています。コラゲナーゼは、配列 -R-Pro-8-X-Gly-Pro-R- を認識し、Xは多くの場合、中性アミノ酸です。

コラゲナーゼは、モル酵素あたり 4 グラム原子カルシウムによって活性化されます。 本製品は、エチレングリコール-ビス(β-アミノエチルエーテル) - N, N, N′,N′-四酢酸、β-メルカプトエタノール、グルタチオン、チオグリコール酸、および 8-ヒドロキシキノリンによって阻害されます。

溶液は通常、TESCAバッファーにより、1～2 mg/mLで調製されます（50 mM TES、0.36 mM塩化カルシウムを含む、37°CでpH 7.4）。
また本製品は、クロストリパイン、非特異的中性プロテアーゼ、およびトリプシン活性を含みます。

1 コラーゲン消化単位（CDU）は、ウシアキレス腱由来コラーゲンからペプチドを遊離し、カルシウムイオン存在下、pH 7.4、37°C、5 時間のニンヒドリン呈色における、1.0 umol のロイシンに相当します。1 FALGPA 加水分解単位は、25°Cで、1 分間あたりに、1.0 umol の furylacryloyl-Leu-Gly-Pro-Ala を加水分解します。1 中性プロテアーゼ単位は、pH 7.5、37°Cでカゼインを加水分解し、5 時間あたり1.0 umol のチロシンに相当する色を生成します。1 クロストリパイン単位は、DTT の存在下、pH 7.6、25°Cで、1 分間あたり　1.0 umol　の BAEE を加水分解します。

提供後、本製品は-20°Cで1年間安定です。37°C、50°C、および-20°Cにおいて、FALGPA またはプロテアーゼ活性の損失は、30日間ありません。未処理のコラゲナーゼ溶液は、一部を（10 mg/mLで）素早く冷凍し、-20°Cで保存すれば安定です。凍結融解の繰り返しによって溶液は劣化します。 本製品は、氷上で7時間以上、活性の100％を保持します。