抗BrdU抗体、クローン131-14871

チミジン類似体、5-ブロモ-2′-デオキシウリジン（BrdU）は、細胞増殖アッセイとアポトーシス細胞の検出に使用される一般的な試薬です。BrdUは、新たに合成されたDNAに容易に組み込まれて細胞周期のS期を経て進行した細胞を標識するため、増殖細胞のマーカーとなります。

抗BrdU抗体 クローン131-14871は、ブロモデオキシウリジン（別名：BrdU）を検出するマウスモノクローナル抗体であり、FC、IHC、IHC（P）において検証済みです。 このブロモデオキシウリジン抗体は、すべての種で反応すると予想されます。

研究カテゴリー
エピジェネティクス・核内機能分子

研究サブカテゴリー
細胞周期、DNA複製および修復

腎臓、十二指腸、および肝臓組織の脱パラフィン切片の免疫組織染色：1:1000-1:1250。

100 μLの106細胞のフローサイトメトリー：1:5000。

最適な希釈濃度は、ご自身で決定してください。

免疫組織染色手順

パラフィン包埋組織切片用

染色手順：

1.キシレン中で5分間、3回、切片を脱パラフィンします。樹脂包埋したまたはGMA（グリコールメタクリレート、2-ヒドロキシエチルメタクリレート）処理した切片の場合は、パラフィンがないため、脱パラフィンは不要です。

2.スライドを2分間隔で段階的にアルコール水溶液（100、95、90%）に入れ、風乾します。（GMA切片では省略してください）

3.識別するためにPAPペンまたはダイアモンドペンで切片に円をつけ、完全に乾燥させます。

4.GMAまたは樹脂切片の場合は、スライドを0.5% Tween/PBS（pH 7.6）中に29分間入れます。

5.予熱した（40°C）1N HCl中で1時間インキュベートします。

6.PBS（pH 7.6）で3分間、3回洗浄します。この時点でスライドを置いておき、翌日に続きの手順を行うことができます。

7.1X トリプシン溶液（0.02～0.05% w/v、40°Cに予熱）で、NBF（通常の緩衝ホルマリン）固定組織の場合は室温で20分間、カルノア固定組織では10分間インキュベートします。

8.PBS（pH 7.6）で5分間、3回洗浄します。

9.切片を1% H2O2（290 mLメタノール中10 mL 30% H2O2）中で20分インキュベートします。もしくは、GMA切片を3% H2O2（90 mL水中10 mL 30% H2O2）で3分インキュベートします。

10.PBS（pH 7.6）で2分間、2回洗浄します。

11.Vector ABCキットを用いて、10 mLのPBSに、正常ウマ血清を3滴加えます。この溶液を用いて、室温で20分間、スライドをブロッキングします。

12.スライドの余分な正常ウマ血清を吸い取り、PBS/BSA/Tween 20で希釈したMAB4072とともに室温で1時間インキュベートします。

13.PBS（pH 7.6）で3分間、3回洗浄します。

14.10 mLのPBSに、正常ウマ血清を3滴加え、次にビオチン化抗体ストックを1滴加えます。スライドを、この希釈した二次抗体とともに、室温で30分間インキュベートします。

15.5 mLのPBSに試薬Aを2滴加えて、Vectastain ABC試薬を調製します。次に、同じ混合ボトルに試薬Bを2滴加えます。約30分間放置してから使用します。

16.PBS（pH 7.6）で3分間、3回洗浄します。

17.スライドを、ABC試薬とともに、室温で30分間インキュベートします。

18.PBS（pH 7.6）で3分間、3回洗浄します。

19.等量の0.02% H2O2（30%原液から蒸留水を使用して作製）および0.1 M Trisバッファー、pH 7.2で作製した0.1% DABを混合することで、基質を調製します。H2O2は濃縮原液から新たに調製してください。多くの過酸化物基質はH2O2の存在下または光にさらされると不安定になるため、基質は使用直前に準備する必要があります。DABは発がん物質の疑いがあるため、すべてのペルオキシダーゼ基質の取り扱いと廃棄には注意してください。

20.スライドをDAB基質で2～5分間染色します。

21.蒸留水で2分間、2 回洗浄します。

22.ヘマトキシリンで対比染色し、キシレンで脱水し、カバースリップを乗せます。

BrdU（ブロモデオキシウリジン）を認識します。

150 mM塩化ナトリウムと0.1%アジ化ナトリウムを含有する10 mMリン酸バッファー（pH 7.4）に溶解。

フォーマット：精製

精製プロテインA

-20°Cで出荷日から2年間保存できます。凍結融解を繰り返さないために、分注してください。製品の回復を最大化させるため、キャップを外す前の元のバイアルを融解後に遠心分離してください。

コントロール
Brdu処理細胞

濃度：ロットに固有の濃度につきましては試験成績書をご参照ください。

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

メルクのカタログまたは製品に添付されたメルクのその他の文書に記載されていない場合、メルクの製品は研究用途のみを目的としているため、他のいかなる目的にも使用することはできません。このような目的としては、未承認の商業用途、in vitroの診断用途、ex vivoあるいはin vivoの治療用途、またはヒトあるいは動物へのあらゆる種類の消費あるいは適用などがありますが、これらに限定されません。