リベラーゼ^™ TM研究用グレード

リベラーゼTM研究用グレードは、高純度のコラゲナーゼIおよびIIを含みます。これらの2つのコラゲナーゼアイソフォームは、それぞれ正確な比率で、中間濃度のThermolysin（非クロストリジウムの中性プロテアーゼ）と共にブレンドされています。

リベラーゼ^™（Thermolysin Medium）研究用グレードは、幅広い組織タイプの分離に使用され、高い細胞回収量と生存率を得るために必要な高純度酵素ブレンドです。エンドトキシンなどの細菌性副産物が、最大で数千倍まで低減されます。

安定剤：カルシウム
使用濃度：Liberase Research Grade Enzymeの使用濃度

Liberase酵素は、従来のコラゲナーゼに比べて著しく高い比活性を有しています。このため、Liberase Research Grade Purified Enzymesのmg/mL単位での使用濃度は、従来のコラゲナーゼの使用濃度よりも低くなります。
このリストにアプリケーションが含まれない場合には、0.08–0.28 Wünschユニット/mLの濃度のLiberase TM Research Gradeをまず使用してください。最終的にLiberase Research Grade Enzyme Blendsの最適な開始濃度を決定することを目標にします。これはあくまで出発点であり、最終濃度は実験方法の違い、および従来のコラゲナーゼのロット間の差により異なる可能性があります。

コラゲナーゼ使用濃度

以前に使用したコラゲナーゼの使用濃度（mg/mL）にその比活性（Wünschユニット/mg、［上記参照］）を乗じてWünschユニット/mLを算出します。Liberase Research Grade Enzyme Blendの使用量を決定するには、まずコラゲナーゼの使用濃度（Wünschユニット/mL）に使用酵素溶液の全容量を乗じて、必要な全コラゲナーゼ活性（Wünschユニット）を算出します。必要な全コラゲナーゼ活性を、Liberase Research Gradeのストック溶液濃度で除します（“再構成と保管”）。これで、リベラーゼ研究用グレード酵素ブレンドストック溶液を、酵素使用液に、何 mL 使用すればよいかが分かります。
保存条件（使用液）：未使用の原液は、使い捨てのアリコートで-15～-25°Cで保管してください。

注：凍結と融解の繰り返しは避けてください。

凍結乾燥酵素を、注入品質の滅菌水または組織分離バッファーで溶解してください。血清や、アルブミンやプロテアーゼ阻害剤などの他の成分を、分離バッファーに加えないでください。酵素の安定性は、高い濃度や、より暖かい温度（4°C）で低下します。上記の両条件を避けてください。

バイアル内のすべてを溶解してください。凍結乾燥物の個々のアリコートを秤量しないでください。バイアル内への湿気の混入は、酵素活性を失活させます。

凍結乾燥酵素を再溶解する際には、バイアルを氷上に置いてください。

酵素が完全に溶解するまで、2～8°Cで緩やかに撹拌してください（最大30分）。

リベラーゼ研究用グレード精製酵素ブレンドを溶解するための組織分離バッファーの種類によっては、わずかに沈殿が観察されることがありますが、希釈した使用液に容易に溶解でき、酵素活性には影響ありません。

使用液を調製するために、ストック溶液の一部を移してください

溶解ボリューム

2 mL（1バイアルあたり5 mg～10 mgのパックサイズ）、10 mL（1バイアルあたり50 mg～100 mgのパックサイズ）

コラゲナーゼWünsch（units/mL）

13（1バイアルあたり5 mg～10 mgのパックサイズ）、26（1 バイアルあたり50 mg～100 mgのパックサイズ）

総コラゲナーゼ濃度 [mg/mL]

2.5（1バイアルあたり5 mg～10 mgのパックサイズ）、5.0（1バイアルあたり50 mg～100 mgのパックサイズ）

容器を密閉し、乾燥した換気の良い場所で保管してください。

ライフサイエンス研究のみに使用できます。診断には使用できません。

Liberase is a trademark of Roche