3,3′,5,5′-Tetramethylbenzidine

TMB基質は、西洋ワサビペルオキシダーゼ（HRP）で発色する基質です。

TMB基質は、西洋ワサビペルオキシダーゼ複合体を使うELISA法で用いられます。TMB基質から、370nmまたは655nmで測定できる可溶性の青色反応生成物が生じます。この反応を酸で停止すると、黄色の反応生成物が生じ、450nmでの正確な吸光度測定が可能になります。

TMB基質の使用方法：

• メルクが提供するTMB基質は、すぐに使用できる、TMB含有ペルオキシダーゼ基質を弱酸性緩衝液で調製しております。ペルオキシダーゼとの反応前の基質は、無色～淡青緑色の溶液です。この基質系はペルオキシダーゼと反応すると青色の反応生成物を生じます。
• 酸を加えてアッセイの終点に達したら、450nmでのTMB基質の吸光度を測定します。
• メルクのTMB基質は、ELISA（マイクロウェル）法に推奨されており、ヘンドラウイルス糖タンパク質、テトラコサクチド、sIgA、好中球細胞外トラップ（NET）を検出するための西洋ワサビペルオキシダーゼ抗体複合体の基質として、さまざまなアッセイで使用されています。
• 3,3′,5,5′-テトラメチルベンジジン（TMB）液基質系は、膜用途にはお勧めしません。TMB基質は可溶性反応生成物を生成するため、組織染色やブロッティングにはお勧めしません。

注：TMB基質は光感受性なので、直射日光や紫外線は避けてください。