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Merck

P4850

プロテイナーゼ K from Tritirachium album

buffered aqueous glycerol solution, Molecular Biology, ≥800 units/mL

別名:

エンドペプチダーゼK

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この商品について

CAS番号:
39450-01-6
UNSPSC Code:
12352204
NACRES:
NA.54
EC Number:
3.4.21.64 (BRENDA, IUBMB)
MDL number:
MFCD00132129

主要文書

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製品名

プロテイナーゼ K from Tritirachium album, buffered aqueous glycerol solution, Molecular Biology, ≥800 units/mL

grade

Molecular Biology

form

buffered aqueous glycerol solution

mol wt

28.93 kDa

concentration

≥10 mg/mL
≥800 units/mL

impurities

≤0.5 ppm DNA (PicoGreen® assay)

foreign activity

DNase, Nickase and RNase, none detected

storage temp.

2-8°C

Quality Level

200

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Application

DNAおよびRNAの分離中にヌクレアーゼのタンパク質分解性不活性化を行うために有用です。
DNAおよびRNA分離中にヌクレアーゼのタンパク質分解性不活性化を行うために有用です。
リゾチーム、リボヌクレアーゼAなどの陽イオン性タンパク質に結合するエンドトキシンを除去します。
肝臓、酵母、リョクトウのミトコンドリアを分離するために有用であることが報告されています
膜上の酵素局在化を評価します
抗体標識のためパラフィン包埋組織切片処理に使用され、抗原結合部位を露出させます。
伝達性海綿状脳症（TSE）研究において、プリオンを調べるために、脳組織サンプルのタンパク質を分解する目的で使用されます。
トリチラチウム・アルバム（Tritirachium album）に由来するプロテイナーゼKは以下のことに使用されています。
  • ヘルペスウイルスDNAを抽出するためのウシ子宮内膜上皮細胞において
  • 鼻腔スワブからウイルスRNAの抽出
  • フェーズロックおよび直接PCR溶解緩衝液の成分

本製品は、絹フィブロインに対するその前処理効果を試験するのに使用されています。本試験で分析される側面には、ヒドロキシアパタイト（HAp）の結晶学的特性、ならびに複合体の微細構造および微小硬度が含まれました。病原性の黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）を検出するFISH技術を使用して、プローブがrRNAに接近するのを促進するためにも、本酵素が使用されてきました。

Biochem/physiol Actions

プロテイナーゼKは、幅広い特異性を有し、また多くのタンパク質を、それが天然状態にあっても分解します。脂肪族アミノ酸のカルボキシル基とブロックされたαアミノ基を有する芳香族アミノ酸に隣接したペプチド結合を開裂させます。アミノ酸配列に基づくプロテイナーゼKの分子量は28,930 Daであることが判明し、またSDS-PAGEによれば28,500 Daであることが判明しています。至適pHは7.5～9.0の間にあり、またその等電点は8.9です。活性化には、Ca2+（1～5 mM）が必要とされます。プロテイナーゼKは、DIFP（ジイソプロピルフルオロリン酸）またはPMSF（フッ化フェニルメチルスルホニル）により阻害されます。
プロテイナーゼＫは安定した反応性の高いセリンプロテアーゼです。結晶構造および分子構造の研究で得られたエビデンスは、この酵素がスブチリシンファミリーに属し、活性部位が触媒三残基造（Asp39-His69-Ser224）を持つことを示しています。プロテイナーゼＫは広範囲の環境（pH、バッファー塩、界面活性剤［SDS］、温度）で安定です。 0.1～0.5%のSDSの存在下でプロテイナーゼKは活性を保ち、DNA調製において分離されたDNAの完全性を損なうことなくさまざまなタンパク質およびヌクレアーゼを分解します。

Other Notes

1ユニットは、尿素変性ヘモグロビンを加水分解して、pH 7.5、37°Cで1分間当たり1.0 μモルのチロシンに相当する呈色を生じる酵素量です（Folin-Ciocalteu試薬により発色）。

Physical form

40%グリセロ-ル溶液(v/v), 10mM Tris-HCl (pH7.5), 1mM酢酸カルシウム含有。

Legal Information

PicoGreen is a registered trademark of Life Technologies

pictograms

Health hazard
GHS08

signalword

Danger

hcodes

H334

Hazard Classifications

Resp. Sens. 1

保管分類

10 - Combustible liquids

wgk

WGK 2

flash_point_f

Not applicable

flash_point_c

Not applicable

ppe

Eyeshields, Faceshields, Gloves, type ABEK (EN14387) respirator filter

最新バージョンのいずれかを選択してください：

試験成績書（COA）

Lot/Batch Number
109M4041V
SLCK5107
SLCK5103
SLCH8569
SLCH8297

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Guidelines on use of proteinase K, an enzyme commonly used to degrade proteins, and protect DNA and RNA from degradation in samples.

How Proteinase K Can Be Used in Blood DNA Extraction Applications

In blood DNA extraction, Proteinase K, an enzyme commonly used to degrade proteins, can help break down the cellular and nuclear membranes, releasing DNA from the cells that protect it from degradation and increase purity/yield making it more suitable for various molecular biology techniques.

Proteinase K in Tissue Samples

Pro K aids in disrupting cell membranes for DNA release, crucial for downstream molecular biology techniques.

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プロトコル

Proteinase K Enzymatic Assay

Proteinase K activity measured via spectrophotometry using hemoglobin substrate, crucial for enzyme characterization.

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