SDS-PAGEゲル用mPAGE^® Luxキャスティングシステム

3分でready-to-useのSDS-PAGEゲルを作製できる、mPAGE^® Luxキャスティングシステムをご覧ください。必要な時にすぐ使える新鮮なSDS-PAGEゲル。 質問がある場合や、短時間でゲルを作る方法を詳しくお知りになりたい場合は、こちらをクリックしてフォームに必要事項をご記入ください。担当者よりご連絡いたします。

SDS-PAGEゲル用mPAGE^® Luxキャスティングシステム

SDS-PAGEゲルをどのようにキャスティングしていますか？ゲルキャスティングでは通常、分離ゲルと濃縮ゲルを積み重ねる必要がありますが、これらは段階的で時間のかかるプロセスです。これまで研究者たちには、ゲルキャスティングと電気泳動のニーズを満たす選択肢がほとんどありませんでした。メルクの画期的なmPAGE^® Lux SDS-PAGEゲルキャスティングシステムは、ハンドキャストゲルの柔軟性とプレキャストゲルの信頼性を兼ね備えた設計になっており、他の選択肢にみられるような品質や時間のロスもなく、コストもそれほど高くありません。mPAGE^® Luxキャスティングシステムを使用すると、3分以内にゲルを作製できます。従来のゲル作製法や時間のかかる手作業に別れを告げることができます。新鮮な経験です。

セクションの概要

• mPAGE^® Luxキャスティングシステムの特長と利点
• ゲルキャスティング手順とは？
• mPAGE^® LuxキャスティングシステムおよびBis-Tris試薬キット
• mPAGE^® Lux SDS-PAGEゲルキャスティングのプロトコル
• MOPSおよびMESのランニングバッファーを用いたmPAGE^® Lux Bis-Trisゲル
• mPAGE^® Luxキャスティングシステムによるサステナブルなゲルキャスティング
• mPAGE^® Luxキャスティングシステム・関連試薬

mPAGE^® Lux キャスティングシステムの特長と利点

これまでお使いのゲルキャスティングプロセスの代わりにmPAGE^® Luxキャスティングシステムを使用すると、より迅速で、より簡単、より安全な方法でより再現性の高い結果が得られます。従来法では硬化に90分以上かかりましたが、mPAGE^® Luxキャスティングシステムではミニゲルを90秒で硬化できます。UV照射を用いたクイックキャスティングワークフローにより、 mPAGE^® Lux Bis-Tris試薬の硬化を迅速に行うことができます。また、Bis-Trisゲルの化学特性により、従来法と比べて泳動時間の短縮が可能です。

精密なシステム制御を用いたワンステップの光重合とシンプルな調製手順により、エラーが生じる可能性が低くなります。mPAGE^® ゲルキャスターは漏れを防ぎ、Bis-Trisゲルの使用によりハンドキャストのTris-Glycineゲルと比べて優れたバンド品質を実現します。さらに、mPAGE^® Lux試薬キット、mPAGE^® TurboMix™およびmPAGE^®プレキャストゲルは、すべてBis-Tris系試薬を使用しており、同じランニングバッファーやゲル染色液を使用できます。mPAGE^® LuxキャスティングシステムはAPSやTEMEDを使用しておらず、有毒化学物質の使用が少ない安全な方法を提供します。

従来のハンドキャストのワークフロー

ゲルキャスティング手順とは？

通常、SDS-PAGEゲルのキャスティングには、計量、ゲル溶液のプレミックス、キャスティング、重合の待ち時間が含まれます。従来のハンドキャストゲル法は、比較的安価なソリューションとしてよく挙げられますが、時間がかかり、多くの作業手順を必要とするため、ゲル組成の均一性が低いことがあります。ハンドキャストゲルから得られるデータの品質は、作製したゲルの一貫性に依存するため、ゲルの欠陥により貴重な試薬と時間を最終的に無駄にすることがありません。

mPAGE^® Luxキャスティングシステムは、ゲルキャスティングプロセスに画期的なソリューションを提供します。時間やリソースを節約する必要はもうありません。新しいゲルキャスティングシステムにより、研究者は、プレキャストゲルの数分の1のコストで、必要なときにゲルを簡単に迅速にキャスティングすることができます。mPAGE^® Luxキャスティングシステムにより、ラボの効率が向上し、ゲル電気泳動のワークフローがアップグレードされます。

mPAGE^® Luxキャスティングシステム・Bis-Tris試薬キット

mPAGE^® Luxキャスティングシステムをラボに導入し、3分以内に作製できるready-to-useのゲルをお試しください。無駄が少なく失敗の心配もない、短時間のゲルキャスティングプロセスをお試しください。新鮮な経験です。mPAGE^® Luxキャスティングシステムキットは、mPAGE^® Lux硬化ステーション、mPAGE^® Lux混合チューブ、mPAGE^®ゲルキャスター、mPAGE^®コーム（10ウェルタイプと15ウェルタイプ）、mPAGE^®ミニスペーサープレート、mPAGE^® Luxマスク付きショートプレート（10ウェルタイプと15ウェルタイプ）で構成されています。ただし、厚さ0.75 mmのmPAGE^® Luxキャスティングシステムには15ウェルコームとマスク付きショートプレートは含まれていません。 キットの説明と構成は以下のとおりです。

 mPAGE^® Lux SDS-PAGEゲルキャスティングのプロトコル

重合を防ぐために、すべての溶液を遮光保存する必要があります。ゲルをキャスティングする前に、すべての溶液を室温に戻してください。

分離ゲル

1. 分離溶液と希釈液を混合して分離ゲル溶液を調製します。混合する液量については、以下の表を参照してください。分離ゲル溶液は、まとめて調製し、順番に複数のゲルを作成することができます。
2. 分離溶液をクリーンなピペットで、黒色の混合チューブまたはその他の不透明の容器に添加します。
3. 希釈液をクリーンなピペットで、同じ混合チューブに添加します。
4. ゆっくりと容器を転倒攪拌させます。ボルテックスは使用しないでください。

分離ゲル溶液の量

1枚の1.0 mmゲルに対して、以下の液量を使用してください。0.75 mmおよび1.5 mmのゲルに対する液量については、SigmaAldrich.comの製品ページで完全版ユーザーガイドをご覧ください。

濃縮ゲル

濃縮ゲル溶液は、ボトルから取り出して直接使用できます。1.0 mmゲルに対して濃縮ゲル溶液1.5 mLを使用してください。重要：濃縮ゲル溶液を希釈しないでください。

ゲルキャスティング

1. ガラスプレートを中性洗剤で洗浄し、脱イオン水ですすぎます。使用前に70%エタノールで拭き取ります。
2. mPAGE^®スペーサープレートとmPAGE^® Luxマスク付きショートプレートを使用してmPAGE^®ゲルキャスターを組み立てて、ガラスカセットを作成します。マスク付きショートプレートは、カセットの左側に文字がくるようにしてください。キャスターフレームの底面で2枚のガラスプレートの位置を調整してから、キャスターのクランプを止めてください。注記：mPAGE^® Luxマスク付きショートプレートは、必ずmPAGE^®硬化ステーションとあわせてご使用ください。
3. 電源ボタンを押してmPAGE^® Lux硬化ステーションの電源を入れます。硬化ステーションが自己診断テストを開始します。自己診断テストが完了すると、準備完了画面が表示されます。
4. 扉を開き、ゲルキャスターを硬化ステーションにセットします。キャスターをバンパーの後ろに合わせてください。
5. クリーンな5 mLピペットを用いて、調製した分離ゲル溶液をmPAGE^®ゲルキャスターフレームの表示ラインまで添加します。
6. クリーンな5 mLピペットを用いて、濃縮ゲル溶液を、ショートプレートの上部までゆっくりと加えます。
7. mPAGE^®コームを、歯部分の下に気泡が形成されない角度でゆっくり挿入します。重要：ウェルタイプの違うコームを使用すると、適切なウェルが形成されない場合があります。使用法は以下のとおりです。
   • 10ウェルmPAGE^® Luxマスク付きショートプレートには10ウェルコームを使用
   • 15ウェルmPAGE^® Luxマスク付きショートプレートには15ウェルコームを使用
8. こぼれた溶液が残っていると硬化が不完全になるため、ショートプレートの正面からこぼれた溶液を拭き取ってください。
9. 硬化ステーションの扉を閉じて、ゲルの厚さを選択します。
10. スタートボタンを押してゲル硬化を開始します。コツ：複数のゲルをキャスティングする場合は、最初のゲルを硬化させている間に、2つめのゲルキャスターでゲルキャスティングプロセスを開始してください。
11. 硬化が完了したら、扉を開きゲルキャスターを取り出します。テンションクリップを下げてキャスターフレームを外し、ゲルキャスターからカセットを取り出します。次に、フレームの側面を開き、上からカセットをスライドさせて取り出します。
12. ゲルは直ちに使用してください。すぐに使用しない場合は、濡らしたペーパータオルでカセットを包み、ジップバッグまたはその他の密閉容器に入れて平らな状態で保管してください。2℃～8℃で最長2週間使用できます。ゲルが乾燥するため、カセットは必ず包んで保管してください。

MOPSおよびMESのランニングバッファーを用いたmPAGE^® Lux Bis-Trisゲル

mPAGE^® Lux Bis-Trisゲルは、MOPSまたはMESランニングバッファーのみで使用できるようデザインされています。どのランニングバッファーを使用するかによって、得られる分離パターンは大きく異なります。MOPSバッファーは、高～中分子量のタンパク質の分離に適しています。一方、MESバッファーは、低分子量のタンパク質の分離に適しています。移動チャート（図8）を参照し、目的の分離範囲に適したゲルランニングバッファー系を決定してください。

電気泳動後のゲルの取り出し方法

ゲルスクレーパーを用いてガラスカセットからゲルを外します。ゲルが裂けないようにゲルの縁（右側）に沿って切り出してください。mPAGE^® Lux Bis-TrisゲルではMOPS-SDSまたはMES-SDSランニングバッファーのみを使用してください。Bis-Trisゲルは、Tris-Glycineランニングバッファーに対応していません。

 mPAGE^® Lux ゲルキャスティングシステムによるサステナブルなゲルキャスティング

メルクのmPAGE^® Luxキャスティングシステムによるサステナブルな影響を定量化するため、タンパク質電気泳動用ハンドキャストポリアクリルアミドゲル作成のために代表的なファストキャストキットを用いた場合との比較で計算を実施しました。いずれのシステムでも、再利用可能なキャスティングキットとハンドキャスティング試薬キットの使用が必要です。mPAGE^® Luxキャスティングシステムでは、さらにmPAGE^® Luxゲル硬化ステーションが必要であり、比較対象システムでは、ハンドキャスティング試薬キットとは別売りのAPSとTEMEDの使用が必要です。

mPAGE^® Luxキャスティングステーションの最小耐用年数である5年にわたる電気泳動ゲルのキャスティングに必要なすべてのコンポーネントが、今回の評価では考慮されています。これには、ハンドキャスティングキットの製造、包装、流通、使用、および販売終了の影響、必要な試薬、そして必要なすべての消耗実験機器が含まれます。年間250、500、または1000枚のゲルを作成する場合を想定して計算を実施し、比較対象システムに対する最小差を報告しました。

材料および製品のサステナビリティ特性

ハンドキャスティングポリアクリルアミドゲルの画期的ワークフローソリューションである一方、mPAGE^® Luxキャスティングシステムでは、いまだにプラスチック消耗品と有害試薬の使用が一部必要となっています。このアプリケーションではアクリルアミドの代わりとして適しているものがありませんが、その他のすべての化学的危険はこのシステムから排除されており、プラスチック消耗品の必要量は、比較対象システムと比べて大幅に削減されています。

mPAGE^® Luxキャスティングシステムで必要なゲル硬化ステーションにより追加される質量は、グラフに示しているように、ゲルキャスティングワークフローに必要な製品の削減により相殺されます。装置の寿命にわたり、全システム質量は、ファストキャストシステムと比べて、20%以上削減されています。

年間500枚のゲルをキャスティングした場合の装置寿命にわたるシステム質量（kg）

さらに、この製品は、包装を減らし、サステナブルな資材を使用し、リサイクルしやすくすることでサステナビリティを改善するメルクの戦略であるSMASHパッケージの原則に準拠しています。

• 装置の性能発揮に必要な製品や追加物品の包装は、比較対象システムと比べて30％削減されています。
• システムの繊維由来包装の100％が、持続可能な森林管理の認証を受けています。
• すべての発泡保護材は100％リサイクルポリエチレン製です。
• 包装には、メルクのSMASHガイドラインで定義されているようにリサイクルを阻害する材料は含まれていません。

mPAGE^® Luxキャスティングシステムの販売と製品使用

必要な消耗品の削減と特定の試薬の排除により、輸送に伴う影響が大幅に低減しました。定期発送されるコンポーネントとそれに伴う包装の質量低減は、装置の最小耐用年数にわたると24%以上となります。

動作中には追加装置もエネルギーを必要としますが、mPAGE^® Luxキャスティングステーションは、エネルギー効率を念頭において設計されました。LED照明の利用とシンプルながら直感的に使えるユーザーインターフェースにより、全体的なエネルギー消費量は著しく低く保たれています。1,000枚のゲルを硬化させるのに必要な累積エネルギー消費量はわずか1.65 kWhで、これは約33時間のラップトップPCの使用に相当します。ゲルキャスティングワークフロー全体でのシングルユースプラスチックの廃棄量は、25％以上削減されます。さらに、mPAGE^® Lux試薬は、環境光曝露下で自己重合するため、廃棄流中の未重合のアクリルアミドの残留がなくなります。

必要に応じて新鮮なすぐに使えるゲルをキャスティングすることで、使用されないまま終わってしまうゲルを作成するというリスクがなくなります。mPAGE^® Luxシステムでは、異なる割合で試薬キットやプレキャストゲルを保存しておく必要がないため、コンポーネントの期限切れにより発生する廃棄量が減ります。mPAGE^® Lux硬化ステーションは電子装置であるため、適用されるすべての規制に準拠して廃棄しなければなりません。電子機器廃棄物の廃棄に関する詳細は、メルクのWEEE Complianceのページをご覧ください。

本製品は、製品寿命全体にわたり比較対象システムと比べて著しい改善が認められ、環境に配慮した代替製品に指定されています。詳細については、メルクの「デザイン・フォー・サステナビリティ」フレームワークおよび「環境に配慮した代替製品」についてのページをご覧ください。