Electroforesis en gel de los ácidos nucleicos
La electroforesis en gel de los ácidos nucleicos es una técnica utilizada en biología molecular para la separación, la identificación y la purificación de fragmentos de ADN y ARN en función de su tamaño y su carga. En esta técnica, las moléculas de ADN y ARN se separan mediante la aplicación de un campo eléctrico para mover los ácidos nucleicos cargados negativamente a través de una matriz de gel de agarosa o de poliacrilamida.
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La matriz de gel actúa como un tamiz dejando que las moléculas más cortas pasen por los poros del gel más deprisa que las moléculas más largas.
- Los geles de agarosa se utilizan más a menudo para la electroforesis del ADN y del ARN, y pueden resolver fragmentos de ADN que van desde los 50 pares de bases (50 pb) hasta los 50 000 pb utilizando técnicas electroforéticas convencionales.
- Los geles de poliacrilamida tienen un intervalo de separación menor y pueden resolver fragmentos de ADN inferiores a ~500 pb con una gran resolución.
- Ambos geles, de agarosa y de poliacrilamida, pueden utilizarse también en ensayos de cambio de la movilidad electroforética (EMSA) para caracterizar las interacciones proteína-ácido nucleico.
Después de la electroforesis, las moléculas de ADN y ARN pueden visualizarse utilizando colorantes o luz UV, extraerse y purificarse del gel, o transferirse a fases sólidas membranosas para hibridación. Estos métodos son técnicas preparativas comunes en clonación, PCR, espectrometría de masas, secuenciación de nueva generación (NGS) y aplicaciones y secuencias de trabajo de las técnicas Northern y Southern.
En nuestro buscador de documentos encontrará las fichas técnicas, los certificados y la documentación técnica.
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