EZ-Magna ChIP^® A/Gクロマチン免疫沈降キット

検出／定量に使用：プロテインA+G

研究カテゴリー
エピジェネティクス・核内機能分子

メルクのカタログまたは製品に添付されたメルクのその他の文書に記載されていない場合、メルクの製品は研究用途のみを目的としているため、他のいかなる目的にも使用することはできません。このような目的としては、未承認の商業用途、in vitroの診断用途、ex vivoあるいはin vivoの治療用途、またはヒトあるいは動物へのあらゆる種類の消費あるいは適用などがありますが、これらに限定されません。

クロマチン免疫沈降（ChIP）は、染色体DNAに結合したタンパク質のin vivo分布をマッピングするための強力な手法です。これらのタンパク質は、ヒストンサブユニットおよび翻訳後修飾、または転写因子、クロマチン調節因子などの他のクロマチン関連タンパク質である場合があります。また、ChIPを用いて、これらのタンパク質が結合したゲノム領域を同定することもでき、逆に、ゲノムの特定の領域に結合するタンパク質を同定することもできます。ChIP法では多くの場合、タンパク質-DNAおよびタンパク質-タンパク質の架橋結合、架橋したクロマチンの断片化、およびその後の標的タンパク質に特異的な抗体を用いたクロマチンの免疫沈降が行われます。標的タンパク質との複合体として単離されたDNA断片は、PCR、DNAマイクロアレイ、DNAシーケンシングなどのさまざまな方法によって同定できます。特定のDNA配列（遺伝子またはゲノムの領域）が目的のタンパク質と結合しているかどうかを確認するためには、標準的または定量的PCRが行えます。ChIPとプロモーターまたはゲノムタイリングマイクロアレイ（ChIP-chip）を組み合わせると、正確な分解能でクロマチン結合タンパク質のDNA結合部位をゲノムワイドで同定できます。あるいは、免疫沈降した染色体DNAから構築したライブラリーのハイスループットシーケンシング（ChIP-Seq）は、哺乳類ゲノムのタンパク質-DNA相互作用のマッピングにおいて、ChIPチップに代わる強力な手段です。

面倒で時間がかかることのある標準的なChIPプロトコルとは異なり、Magna ChIPキットプロトコルでは、ChIP実験を実施するのに必要な時間を、3日から1日に短縮できます。また、Magna ChIP反応容量が少ないほど抗体の相対濃度が高くなるため、少ない抗体量および切断したクロマチン量でChIP反応が行えます。最後に、このキットはプロテインAビーズとプロテインGビーズの混合物を使用しているため、AまたはGのみの場合よりも広範な抗体アイソタイプを使用できます。これにより、多様な抗体を使用でき、プロテインAおよびプロテインGに基づく免疫沈降用のキットを別途購入する必要がありません。Magna ChIPキットは常磁性ビーズを使用しているため、自動ハイスループットプラットフォームに対応でき、多数のChIP反応を同時に実施できます。特長・利点：

• 磁気ビーズをベースとした迅速なプロトコルにより、わずか1日でChIPを実施できます
• プロテインA+Gビーズをブレンドすることで、AまたはGのみの場合よりも幅広い範囲の抗体を用いたChIPが行えます
• ネガティブおよびポジティブコントロール抗体とコントロールプライマーセットにより、実験プロトコルのバリデーションが簡単です
• DNA精製を簡単に高い信頼性で行えるスピンカラム付きです - 煩雑なフェノール-クロロホルム抽出は不要です
• 信頼性の高い再現性のある結果を得るための、必要な試薬をすべて含む完全なキットです
• ChIPAb+検証済み抗体およびプライマーセットに適合します

クロマチン免疫沈降（ChIP）は、タンパク質とゲノムDNAとのin vivo相互作用を解析できる重要な手法です。クロマチン結合タンパク質またはDNA結合タンパク質は、そのタンパク質に対する良好な抗体が存在する場合はすべて、この技術を用いて分析できます。ゲノムの特定の領域に局在するさまざまなタンパク質や、特定のタンパク質のゲノムワイドな分布を測定できます。この技術のもう一つの強力な用途は、転写、有糸分裂、DNA修復などの過程と相関するヒストン修飾の変化を解析することです。

磁気プロテインA/Gビーズ

ChIP希釈用バッファー

低塩洗浄バッファー

高塩洗浄バッファー

LiCl洗浄バッファー

TEバッファー

細胞可溶化バッファー

核可溶化バッファー

ChIP溶出バッファー（w/oプロテイナーゼK)

プロテイナーゼK

RNアーゼA

10Xグリシン

10X PBS

プロテアーゼインヒビターカクテルII

抗RNAポリメラーゼII、クローンCTD4H8

正常マウスIgG

コントロールプライマー

スピンフィルター

コレクションチューブ

結合試薬A

洗浄試薬B

溶出試薬C

キットの容量：クロマチン免疫沈降アッセイ22回分

22回のクロマチン免疫沈降（ChIP）反応を実施するために必要なすべての試薬を含む2つのボックス。提供されるバッファーは、最大5枚の15 cmプレートの培養細胞からクロマチンを十分に作製でき、各プレートから最大10のクロマチンサンプル（細胞とアッセイタイプによって異なる）が得られます。

受領後は、成分をラベルに示された温度で保存してください。キット成分は、指示通り保存した場合、出荷日から1年間安定です。

MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany