製品名
OxyBlotタンパク質酸化検出キット, The OxyBlot Protein Oxidation Detection Kit provides the reagents to perform the immunoblot detection of carbonyl groups introduced into proteins by oxidative reactions with ozone or oxides of nitrogen or by metal catalyzed oxidation.
manufacturer/tradename
Chemicon®
OxyBlot
technique(s)
western blot: suitable
detection method
chemiluminescent
shipped in
wet ice
Quality Level
Application
1.接着細胞をディッシュまたはフラスコ内で氷冷PBSで2回洗浄し、PBSを除去します。非接着細胞をPBSで洗浄し、卓上遠心機で800~1000 rpmで5分間遠心分離して細胞をペレット化します。
2.氷冷したRIPAバッファーを細胞に加えます(107細胞/100 mmディッシュ/150 cm2フラスコあたり1 mL、5 x 106細胞/60 mmディッシュ/75 cm2フラスコあたり0.5 mL)。
3.氷冷蒸留水で冷却したゴム製ポリスマンまたはプラスチック製セルスクレーパーを用いて、接着細胞をディッシュまたはフラスコから剥がし取ります。細胞懸濁液を遠心チューブに移します。低温室内のロッカーまたはオービタルシェーカーで15分間、懸濁液を穏やかに振盪し、細胞を溶解させます。
4.予冷した遠心分離機でライセートを14,000 x gで15分間遠心します。上清を直ちに新しい遠心チューブに移し、ペレットを廃棄します。
5.タンパク質濃度を測定する前に、細胞ライセートを少なくとも1 : 10に希釈します。溶解バッファー中の界面活性剤がクーマシーベースの試薬に干渉するためです。このステップで、サンプルを分注して、-20¡Cで最長1カ月間保存することができます。
TIP:大量の非接着細胞を扱う場合、細胞を十分に急速冷却できず、検討したいタンパク質の活性を維持できない場合があります。この場合は、2xPBSと氷を等量混合したものに細胞懸濁液を入れた後、遠心分離により細胞を回収して、上記のとおり溶解を行ってください。
RIPA溶解バッファー:
カタログ番号20-188
http://www.millipore.com/catalogue/item/20-188
還元剤は酸化を防ぐために非常に重要です。
タンパク質ライセートは、さまざまなプロトコルを用いて調製できます。RIPAやTritonなどの標準的なほとんどのバッファーも適しています。細胞溶解後に起こりうるタンパク質の酸化を防ぐために、溶解バッファーに還元剤を添加することをお勧めします。1~2%の2-メルカプトエタノールまたは50 mM DTTを含む溶解バッファーは、この酸化を十分に阻害でき、OxyBlotプロトコルの誘導体化反応に悪影響を与えることはありません。精製したタンパク質サンプルも、OxyBlotキットを用いた分析に適しています。
タンパク質抽出に関する一般的な情報については、このリンクをご覧ください。
http://www.millipore.com/immunodetection/id3/proteinextraction
Disclaimer
General description
Preparation Note
Legal Information
signalword
Warning
hcodes
Hazard Classifications
Met. Corr. 1 - Skin Sens. 1
保管分類
8A - Combustible corrosive hazardous materials
試験成績書(COA)
製品のロット番号・バッチ番号を入力して、試験成績書(COA) を検索できます。ロット番号・バッチ番号は、製品ラベルに「Lot」または「Batch」に続いて記載されています。
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"Aging: getting older, exhibiting the signs of age, the decline in the physical (and mental) well-being over time, leading to death. Since the beginning of time, man has been obsessed with trying to slow down, stop, or even reverse the signs of aging. Many have gone as far as experimenting with nutritional regimens, eccentric exercises, fantastic rituals, and naturally occurring or synthetic wonder-elements to evade the signs of normal aging. Biologically speaking, what is aging? And what does the latest research tell us about the possibility of discovering the elusive “fountain of youth”? Many advances in our understanding of aging have come from systematic scientific research, and perhaps it holds the key to immortality. Scientifically, aging can be defined as a systems-wide decline in organismal function that occurs over time. This decline occurs as a result of numerous events in the organism, and these events can be classified into nine “hallmarks” of aging, as proposed by López-Otin et al. (2013). Several of the pathologies associated with aging are a direct result of these events going to extremes and may also involve aberrant activation of proliferation signals or hyperactivity. The hallmarks of aging have been defined based on their fulfillment of specific aging related criteria, such as manifestation during normal aging, acceleration of aging if experimentally induced or aggravated, and retardation of aging if prevented or blocked, resulting in increased lifespan. The nine hallmarks of aging are genomic instability, telomere attrition, epigenetic alterations, loss of proteostasis, deregulated nutrient sensing, mitochondrial dysfunction, cellular senescence, stem cell exhaustion, and altered intercellular communication. The biological processes underlying aging are complex. By understanding the hallmarks in greater detail, we can get closer to developing intervention strategies that can make the aging process less of a decline, and more of a recline."
グローバルトレードアイテム番号
| カタログ番号 | GTIN |
|---|---|
| S7150 | 08436037122958 |
ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.
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