ノイラミニダーゼ(シアリダーゼ)

N-アセチル-ノイラミノシル-D-ラクトースを基質として、37 °C、pH 5.5 で約 40 U/mg の酵素タンパク質。

ノイラミニダーゼは、オリゴ糖、多糖、ムコ多糖、糖タンパク質、糖脂質に結合(率：α2,3-、α2,6-、α2,8)されたα2,3-、α2,6-またはα2,8である末端のN-またはO-アシルノイラミニン酸を加水分解するアシルノイラミニル・ヒドロラーゼです。糖脂質の加水分解に界面活性剤が存在する必要があることは注目に値します。この酵素は広範な基質特異性をもつため、多種多様な生体材料(例えば、細胞診、細胞表面、ウイルスなど)の複合糖質からシアル酸を完全に除去するのに非常に適しています。

ノイラミニダーゼは、

• 脱グリコシル化研究のためにCHO (チャイニーズ・ハムスター卵巣)
• 細胞内のcis作用シアル酸を取り除くのに使用されています。

ガラクトース、Hex、NAc、またはオリゴサッカライド／複合糖質もしくはコロミン酸のN-またはO-アシル化ノイラミニル残基に結合された、α2,3-、α2,6-、またはα2,8である末端のN-またはO-アシルノイラミン酸を加水分解します。相対的な分解率は、三および四糖類での結合で測定されたα2,3 >α2,6 >α2,8です。

50 mM酢酸ナトリウム、154 mM塩化ナトリウム、9 mM塩化カルシウム、0.1%マイクロ-O-プロテクト(w/v)、ヒト血清アルブミン、25 mg/l、pH 5.5中の溶液。調製物は10 mMのEDTAを含有します。
注：この調製物に用いる血清は、現行の品質管理手順に従ってHBs抗原に対して、およびHIV-1、HIV-2、HCV抗体の存在に対して試験し、陰性であることが分かりました。

1単位は、
10 mM N-アセチル-ノイラミノシル-D-ラクトース、50 mM酢酸ナトリウム、4 mM塩化カルシウム、ウシ血清アルブミン、100 μg/ml、pH 5.5というインキュベーション条件下で1 μモルのN-アセチル-ノイラミノシル-D-ラクトースを+37°Cで1分以内に加水分解する酵素活性です。活性は、放出されたD-ラクトースをβ-ガラクトシダーゼ／ガラクトース・デキヒドロゲナーゼ法で測定して判定します。同じ条件下で、1 Uのノイラミニダーゼによって毎分1 μモルのN-アセチルノイラミン酸がヒト酸性α₁-糖タンパク質(10 mg/mlのインキュベーション混合物)から分離されます。放出されたN-アセチル-ノイラミン酸は、チオバルビツール酸法などを用いて測定可能です。

生命科学研究用途に限ります。診断措置において使用しないでください。

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