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この商品について
UNSPSC Code:
12352204
NACRES:
NA.54
Specific activity:
10000 U/mL
Biological source:
bacterial (Brevibacterium linens)
biological source
bacterial (Brevibacterium linens)
form
solution
specific activity
10000 U/mL
packaging
pkg of 1,000 U (11558170001 [10 U/μl]), pkg of 200 U (11558161001 [10 U/μl])
manufacturer/tradename
Roche
parameter
37 °C optimum reaction temp.
color
colorless
pH
8.1 (39 °F)
solubility
water: miscible
suitability
suitable for molecular biology
application(s)
life science and biopharma
sample preparation
foreign activity
Endonucleases, none detected (up to 20 U with MWM II-DNA), Endonucleases, none detected (up to 20U with pBR 322-DNA)
shipped in
dry ice
storage temp.
−20°C
General description
Bln Iは配列C↓CTAGGを認識して、5′-付着末端を有するフラグメントを生成します。
適合する末端
Bln I末端は、Nhe I、Spe IおよびXba Iによって生成された末端と互換性があります。
イソ制限酵素
Bln Iは、Avr IIのイソ制限酵素です。
注：E.coli（大腸菌）ゲノムの完全な13部位のAvr II制限マップが報告されています。
メチル化の感度
本酵素がメチル化に影響されるかは不明です。
適合する末端
Bln I末端は、Nhe I、Spe IおよびXba Iによって生成された末端と互換性があります。
イソ制限酵素
Bln Iは、Avr IIのイソ制限酵素です。
注：E.coli（大腸菌）ゲノムの完全な13部位のAvr II制限マップが報告されています。
メチル化の感度
本酵素がメチル化に影響されるかは不明です。
Biochem/physiol Actions
認識部位：CCTAGG
CCTAGG
制限酵素切断部位：C↓CTAGG
C↓CTAGG
熱失活：65°Cで15分間のインキュベーション後、Bln Iの失活なし。
CCTAGG
制限酵素切断部位：C↓CTAGG
C↓CTAGG
熱失活：65°Cで15分間のインキュベーション後、Bln Iの失活なし。
各DNAの切断部位数
- λ：2
- φX174：0
- Ad2：2
- M13mp7：0
- M13mp18：0
- pBR322：0
- pBR328：0
- pUC18：0
- SV40：2
Preparation Note
−25°C以下で保存しないこと。
Analysis Note
PFGE試験済み
Bln Iはパルスフィールドゲル電気泳動法で試験されています（細菌染色体上）。PFGE分析のためにアガロースに埋め込まれたゲノムDNA（E.coli C 600）の切断には、10 Uの酵素/μg DNAを使用して4時間インキュベーションすることを推奨します。
Bln Iはパルスフィールドゲル電気泳動法で試験されています（細菌染色体上）。PFGE分析のためにアガロースに埋め込まれたゲノムDNA（E.coli C 600）の切断には、10 Uの酵素/μg DNAを使用して4時間インキュベーションすることを推奨します。
SuRE/Cutバッファーシステム
最適の活性を得るためには太字で記したバッファーが推奨されます。
最適の活性を得るためには太字で記したバッファーが推奨されます。
- A：25～50％
- B：50～75％
- H：100％
- L：0～10％
- M：25～50％
非特異的エンドヌクレアーゼ活性なし。
1 μg λDNAを、過剰量のBln Iとともに50 μL SuRE/Cut Buffer H中で16時間インキュベートします。酵素特異的パターンを変化させない酵素単位の数は分析証明書に記載されています。
エキソヌクレアーゼ活性なし
約5 μg [3H]標識仔ウシ胸腺DNAを、全量100 μl 50 mM Tris-HCl、10 mM MgCl2、1 mMジチオエリトリトール（pH約7.5）中で3 μl Bln Iとともに+37°Cで4時間インキュベートします。試験成績書で述べられているように、これらの条件下で放射能の放出は検出されません。
標準的なライゲーションと再切断アッセイ
66 mM Tris-HCl、5 mM MgCl2、5 mMジチオトレイトール、1 mM ATP、pH 7.5（+20°C）を含む10 μLの緩衝液中で1 U T4 DNAリガーゼとともに、+4°Cで16時間ライゲーションした1 μg λ x EcoR I DNAの完全消化により得られたBln Iフラグメント。ライゲーションが可能で、その後Bln IおよびEcoR I（λ x EcoR I x Bln Iフラグメントの典型的なパターンを生成する）で再切断できる製品の割合（％）は、分析証明書の「Lig」と「Rec」に記載されています。
1 μg λDNAを、過剰量のBln Iとともに50 μL SuRE/Cut Buffer H中で16時間インキュベートします。酵素特異的パターンを変化させない酵素単位の数は分析証明書に記載されています。
エキソヌクレアーゼ活性なし
約5 μg [3H]標識仔ウシ胸腺DNAを、全量100 μl 50 mM Tris-HCl、10 mM MgCl2、1 mMジチオエリトリトール（pH約7.5）中で3 μl Bln Iとともに+37°Cで4時間インキュベートします。試験成績書で述べられているように、これらの条件下で放射能の放出は検出されません。
標準的なライゲーションと再切断アッセイ
66 mM Tris-HCl、5 mM MgCl2、5 mMジチオトレイトール、1 mM ATP、pH 7.5（+20°C）を含む10 μLの緩衝液中で1 U T4 DNAリガーゼとともに、+4°Cで16時間ライゲーションした1 μg λ x EcoR I DNAの完全消化により得られたBln Iフラグメント。ライゲーションが可能で、その後Bln IおよびEcoR I（λ x EcoR I x Bln Iフラグメントの典型的なパターンを生成する）で再切断できる製品の割合（％）は、分析証明書の「Lig」と「Rec」に記載されています。
PCRバッファー中の活性：試験せず
Other Notes
1単位は、総量25 μL（1倍）のSuRE/Cut Buffer H中で+37°C、1時間で1 μg λ x EcoR I DNAフラグメントを完全に切断する酵素活性です。
生命科学研究用途に限ります。診断措置において使用しないでください。
キットの構成要素のみ
製品番号
詳細
- Enzyme Solution
- SuRE/Cut Buffer H 10x concentrated
保管分類
12 - Non Combustible Liquids
wgk
WGK 1
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flash_point_c
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