製品名
Pwo SuperYield DNAポリメラーゼ, suitable for PCR, Difficult Templates/Specialty Enzymes PCR, hotstart: no, dNTPs included: no
biological source
(pyrococcus woesei)
form
liquid
usage
sufficient for ≤200 reactions (04340850001)
sufficient for 200 reactions
sufficient for ≤40 reactions (04340868001)
sufficient for 40 reactions
specific activity
5 U/μL
mol wt
~ 90 kDa
feature
Difficult Templates/Specialty Enzymes PCR
High Fidelity PCR
dNTPs included: no
hotstart: no
packaging
pkg of 100 U (04340868001)
pkg of 500 U (04340850001 [2 x 250 U])
manufacturer/tradename
Roche
concentration
50 U/mL
parameter
72 °C optimum reaction temp.
technique(s)
PCR: suitable
color
colorless
input
purified DNA
pH
8.0 (39 °F)
solubility
water: miscible
suitability
suitable for PCR
NCBI accession no.
UniProt accession no.
application(s)
life science and biopharma
foreign activity
Endonuclease 30 units, none detected
Nicking activity 30 units, none detected
storage temp.
−20°C
Quality Level
関連するカテゴリー
Analysis Note
Application
- Pwo SuperYield DNA Polymeraseは、組換え酵素Pwo DNA Polymeraseと新たに最適化された緩衝系を組み合わせたものです。Pwo SuperYield DNA Polymeraseは、増幅産物の配列決定または本製品のクローン化(例:遺伝子産物の発現のため)を目的としたDNAの増幅に使用されます。この酵素は忠実度が高いため、特に以下の用途に適しています:高忠実度PCR
- 部位特異的変異導入
- クローニング
- 遺伝子発現
- 個々のRNA転写産物におけるアレル(対立遺伝子)多形の研究
- 組織のまれな変異の特性評価
- 単一細胞または単一DNA分子のアレルステージの特性評価
Biochem/physiol Actions
Features and Benefits
- Taq DNA Polymeraseと比較して、収率が高く、18倍高い忠実度を有します
- 難しいテンプレートを用いても高い性能。
- クローニングの作業ステップが減ります。
General description
本酵素は、PCRで効率的に核酸を標識するための修飾ヌクレオチドを受け入れます。
PCR産物は、平滑末端ライゲーション用に直接使用できる平滑末端です。
付属のマグネシウム含有反応緩衝液を使用すると、MgCl2の最終濃度は1.5 mMになります。
Pwo SuperYield DNA Polymeraseは、この温度での半減期が5分未満であるTaq DNA Polymeraseと比較して、熱安定性が高く、半減期が+100°Cで2時間を超えます。
Legal Information
Other Notes
Pwo DNA Polymeraseは、ジゴキシゲニンdUTP、ビオチンdUTP、フルオレセインdUTPなどの修飾ヌクレオチドを受け入れます。このように、PCR中にこれらのヌクレオチドをDNAに追加できます。これらの非放射性標識製品は、多くの用途でハイブリダイゼーションプローブとして使用できます。
単位アッセイ:活性化DNAのアッセイ用インキュベーション緩衝液
20 mM Tris-HCl、pH 8.8(20°C)、50 mM KCl、2.5 mM MgCl2、10 mM 2-メルカプトエタノール、0.2 mMの各dATP、dCTP、dGTP、dTTP。
インキュベーション法:
12.5 mgの活性仔ウシ胸腺DNAと0.1 mCi [α-32P]dCTPを0.01~0.1 UのPwo SuperYield DNA Polymeraseとともに、パラフィン油で覆った50 μLのインキュベーション緩衝液中で+70°C、30分間インキュベートします。取り込まれたdNTPの量は、トリクロロ酢酸沈殿法により、続いてシンチレーション計数により測定します。
体積活性:5 U/μL
Packaging
キットの構成要素のみ
- Pwo SuperYield DNA Polymerase 5 U/μl
- PCR buffer, containing 15 mM MgSO4 10x concentrated
- GC-RICH Solution 5x concentrated
hcodes
pcodes
Hazard Classifications
Aquatic Chronic 3
保管分類
12 - Non Combustible Liquids
wgk
WGK 2
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does not flash
flash_point_c
does not flash
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