Annexin-V-FLUOS 染色キット

ホスファチジルセリン（PS）に高いアフィニティーを示す標識アネキシン-V は、アポトーシス細胞の外層上に存在する PS の高感度なプローブです。壊死細胞上にも膜完全性の損失により PS が存在するため、ヨウ化プロピジウムを DNA 染色剤として使用することで壊死細胞をアネキシン-V-標識細胞から識別します。フィコエリトリンまたは TRITC で標識したモノクローナル抗体による膜表面染色など、その他の二次標識によりさらに詳細な細胞特性を検討することが可能です。

アネキシン-V-FLUOS は、負の電荷を持つリン脂質表面に Ca²⁺-依存的に結合し、ホスファチジルセリンに高い特異性を示します。このため、アポトーシス細胞および壊死細胞を染色します。ヨウ化プロピジウムは DNA が漏出した壊死細胞のみを染色するため、アポトーシス細胞と壊死細胞識別することが可能です。

アポトーシスの初期の段階では細胞表面において変化が生じます。これらの細胞膜変化の一つが細胞膜内側から外層へのホスファチジルセリン（PS）の移動であり、PS が細胞表面に現れます。マクロファージは、アポトーシスの過程においてリンパ球の細胞表面上に現れる PS を特異的に認識します。アポトーシス細胞体の認識およびファゴサイトーシスは、通常壊死を伴う炎症につながる細胞成分への生物の曝露を防ぎます。アネキシン V は 35.8kDa の Ca²⁺ -依存性リン脂質結合タンパク質であり、PS への親和性が高いため、標識アネキシンは PS の優れた検出試薬となります。

検出：アネキシン-V-FLUOS は FACS 分析および免疫化学法において二次検出系を使用せずに直接検出できます。

サンプル材料：細胞株および新鮮な分離細胞。

単一細胞レベルでのアポトーシスの検出と定量ならびに壊死との識別のための、FLUOS-結合アネキシン-V およびヨウ化プロピジウムを含むキット。

ライフサイエンス研究専用。診断目的での使用はできません。

1 キットには 3 つの成分が含まれます。

ワーキング溶液：20 μL　の アネキシン-V-FLUOS 標識試薬を1 mL の インキュベーションバッファーで予備希釈し、20 μLのヨウ化プロピジウム溶液を添加します。
注意：1 mL は10 回分の試料に対して十分な量です。
保存条件（使用溶液）：希釈染色溶液は、使用直前に調製します。