recombinant
expressed in E. coli
assay
≥90% (SDS-PAGE)
form
liquid
usage
sufficient for 25 reactions
sufficient for 50 reactions
sufficient for 500 reactions
specific activity
0.05 U/mg
feature
dNTPs included: no
hotstart: no
manufacturer/tradename
Roche
packaging
pkg of 200 reactions (03531287001)
pkg of 25 reactions (03531317001)
pkg of 50 reactions (03531295001)
technique(s)
RT-PCR: suitable
RT-qPCR: suitable
color
colorless
pH
7.2
solubility
water: miscible
suitability
suitable for molecular biology
UniProt accession no.
application(s)
genomic analysis
life science and biopharma
detection method
probe-based
foreign activity
DNase activity, none detected
Nicking activity, none detected
RNase activity, none detected
storage temp.
−20°C (−15°C to −25°C)
Quality Level
関連するカテゴリー
Analysis Note
トランスクリプターリバーストランスクリプターゼの各ロットは規定を設けてRT-PCRで機能テストされています：
- ヒト骨格筋の全RNAからスタートし、従来のサーマルサイクラーを用いてヒトジストロフィン遺伝子由来の10 kbのフラグメントを検出します。
- ライトサイクラー®インストルメントを用い、in vitro転写ヒトPBGD RNAの5 x 102～5 x 106個のコピーを検出します。結果は固定の交差ポイントおよび固定の蛍光強度で定義されます。
Application
トランスクリプターリバーストランスクリプターゼは、次の用途のために、従来のサーマルサイクルおよびリアルタイムPCR装置を使用して（LightCycler®装置など）さまざまな供給源からRNA（mRNA、全RNA、ウイルスRNAおよびin vitro転写RNA）を転写するように設計されています。
- 増幅反応に使用するために第一鎖cDNAを合成
- GC-リッチRNAテンプレートのRT-PCR
- cDNA合成中のCy3、Cy5、DIGビオチンおよびアミノアリルによる標識
- mRNAの5′および3′末端のRACEによる回収およびクローニング
- 大きいインサートによるcDNAライブラリの生成
- ジデオキシDNAシーケンシング
- RNAシーケンシング
- DNAフラグメントの3′末端標識
- ゲノムフットプリント法に用いる一本鎖プローブの生成
- ヒトパピローマウイルスE6、皮質組織、線条体組織、ベッカー型筋ジストロフィー患者から得た筋生検組織、卵母細胞から得たmiRNAステムループ、ヒト大脳微小血管内皮細胞（hCMVEC）からのRNAの逆転写
Biochem/physiol Actions
ヒト免疫不全ウィルスタイプ1のリバーストランスクリプターゼ（HIV-1 RT）は、宿主細胞染色体に組み込まれた二本鎖の直鎖状DNA中への単鎖ウィルスRNAの触媒的転換に不可欠です。
Features and Benefits
- 二段階RT-PCRで高い感度が達成できます。
- 最大14kbの完全長転写物がより多く得られます。
- 難しいテンプレートを逆転写します。
- 効率的にcDNAを標識化します。
General description
ヒト免疫不全ウィルスタイプ1のようなレトロウィルス（HIV-1）では、リバーストランスクリプターゼ（RT）はコア酵素です。HIV-1 RT は66 kDaおよび51 kDa（p66およびp51）の2つのサブユニットから作られています。HERV-Kファミリーのヒト内生レトロウィルスはリバーストランスクリプターゼ（RT）酵素をコードします。
最大14kbのRNAフラグメントの強力な転写のための組換えリバーストランスクリプターゼが、サーマルサイクラーおよびリアルタイムPCR装置での二段階RT-PCRで使用されます。
Other Notes
- トランスクリプターリバーストランスクリプターゼ、保存緩衝液中
- トランスクリプターRT緩衝液、5倍濃縮
生命科学研究専用です。診断手順には使用しません。
Preparation Note
容積活性：20 U/µL。
長い、希少な、あるいは困難なRNAターゲットの転写
トランスクリプターリバーストランスクリプターゼ は、以下のRT - PCRに推奨されます：
多くの応用のための標識化
トランスクリプターリバーストランスクリプターゼはさらに、 多様な修飾ヌクレオチド（Cy3-、Cy5-、DIG-、ビオチン-、あるいはアミノアリル-標識dNTPなど）を受容するため、標識cDNAの調製にも推奨されます。
反応の要件
トランスクリプターはssRNAおよびssDNAテンプレートを受容し、転写のためのプライマーを必要とします。
長い、希少な、あるいは困難なRNAターゲットの転写
トランスクリプターリバーストランスクリプターゼ は、以下のRT - PCRに推奨されます：
- 長いターゲット（最大14 kbのRNAテンプレートの希少なターゲットを転写することができるため）
- 希少なターゲット（感度が高いため）
- GCリッチのターゲット（最高+65oCの高温で操作することができ広範囲な二次構造と関連する問題を排除できるため）
多くの応用のための標識化
トランスクリプターリバーストランスクリプターゼはさらに、 多様な修飾ヌクレオチド（Cy3-、Cy5-、DIG-、ビオチン-、あるいはアミノアリル-標識dNTPなど）を受容するため、標識cDNAの調製にも推奨されます。
反応の要件
トランスクリプターはssRNAおよびssDNAテンプレートを受容し、転写のためのプライマーを必要とします。
凍結と融解の繰り返しは避けてください。
Legal Information
LightCycler is a registered trademark of Roche
保管分類
12 - Non Combustible Liquids
wgk
WGK 1
flash_point_f
does not flash
flash_point_c
does not flash
Pietro Spitali et al.
Journal of cachexia, sarcopenia and muscle, 9(4), 715-726 (2018-04-24)
Analysis of muscle biopsies allowed to characterize the pathophysiological changes of Duchenne and Becker muscular dystrophies (D/BMD) leading to the clinical phenotype. Muscle tissue is often investigated during interventional dose finding studies to show in situ proof of concept and
Crystal structure of human immunodeficiency virus type 1 reverse transcriptase complexed with double-stranded DNA at 3.0 A resolution shows bent DNA.
Jacobo-Molina A, et al.
Proceedings of the National Academy of Sciences of the USA, 90(13), 6320-6324 (1993)
Identification of an active reverse transcriptase enzyme encoded by a human endogenous HERV-K retrovirus.
Berkhout B, et al.
Journal of Virology, 73(3), 2365-2375 (1999)
Tracking disease progression non-invasively in Duchenne and Becker muscular dystrophies
Spitali P, et al.
Journal of Cachexia, Sarcopenia and Muscle, 9, 715-726 (2018)
Fernando E Padovan-Neto et al.
Nitric oxide : biology and chemistry, 83, 40-50 (2018-12-12)
In Huntington's disease (HD), corticostriatal and striatopallidal projection neurons preferentially degenerate as a result of mutant huntingtin expression. Pathological deficits in nitric oxide (NO) signaling have also been reported in corticostriatal circuits in HD, however, the impact of age and
関連コンテンツ
RT-qPCRは、遺伝子発現や病原体検出における用途で、特定のターゲットを検出します。
RT-qPCR detects specific targets with applications in gene expression and pathogen detection.
ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.
製品に関するお問い合わせはこちら（テクニカルサービス）