コラゲナーゼ Clostridium histolyticum由来

Collagenase from Clostridium histolyticum comprises of collagenases G and H. Collagenase has N-terminal activator domain and C-terminal peptidase domain. The collagen binding domains (CBD) and polycystic kidney disease-like (PKD-like) domain resides in the peptidase domain. The collagenase module undergoes structural changes upon calcium binding.

Collagenase from Clostridium histolyticum has been used:

• for the recovery of neutrophils from collagen gels
• for the dissociation of breast tumor biopsies into single cells
• for the isolation of primary human endometrial stromal cells(HESC) from endometrial biopsies

Collagenase from Clostridium histolyticum may be used for the isolation of cells from many types of animal tissue. It may be used for the disaggregation of human tumor, mouse kidney, human adult/fetal brain, lung and many other tissues. It may also be used in liver and kidney perfusion studies, for the digestion of pancreas, isolation of nonparenchymal rat liver cells and for hepatocyte preparation.

コラゲナーゼは、モル酵素あたり 4 グラム原子カルシウムによって活性化されます。 本製品は、エチレングリコール-ビス(β-アミノエチルエーテル) - N, N, N′,N′-四酢酸、β-メルカプトエタノール、グルタチオン、チオグリコール酸、および 8-ヒドロキシキノリンによって阻害されます。

Crude collagenases are mixtures of enzymes (mostly proteases) secreted by C. histolyticum. Effective release of cells from tissue requires the action of both collagenase enzymes and the neutral protease. Collagenase is activated by four gram atom calcium (Ca²⁺) per mole enzyme. The culture filtrate is thought to contain at least 7 different proteases ranging in molecular weight from 68-130 kDa.

Product sold on the basis of collagen digestion units (CDU).

Collagenase may be dissolved in TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM Calcium chloride, pH 7.4 at 37 °C) at 0.05-0.1 mg/mL concentration.

1 コラーゲン消化単位（CDU）は、ウシアキレス腱由来コラーゲンからペプチドを遊離し、カルシウムイオン存在下、pH 7.4、37°C、5 時間のニンヒドリン呈色における、1.0 umol のロイシンに相当します。1 FALGPA 加水分解単位は、25°Cで、1 分間あたりに、1.0 umol の furylacryloyl-Leu-Gly-Pro-Ala を加水分解します。1 中性プロテアーゼ単位は、pH 7.5、37°Cでカゼインを加水分解し、5 時間あたり1.0 umol のチロシンに相当する色を生成します。1 クロストリパイン単位は、DTT の存在下、pH 7.6、25°Cで、1 分間あたり　1.0 umol　の BAEE を加水分解します。