クレアチンホスホキナーゼ ウサギ筋肉由来

タンパク質はBiuret法で測定。

シグマの酵素は、ラットの脳から単離された海馬神経細胞内のクレアチンりん酸の測定に使用されています。

分子量:約81,000
クレアチンホスホキナ-ゼは主に骨格筋由来のホモ二量体(MM)からなる二量体です。特に心筋では、ヘテロ二量体(MB)としても存在します。脳組織のクレアチンホスホキナ-ゼは主に脳由来のホモ二量体(BB)からなっています。M鎖とB鎖とのアミノ酸配列の間には約80%の相同性があります。配列から求めたM鎖の分子量は43,112です。

E^1%_{(280) =} 8.76

至適pH:正反応はpH 8.8~9.0, 逆反応はpH 6.0~7.0。

組織に広く分布する細胞酵素です。収縮系や輸送系でのATP産生に関連する生理学的役割を果たします。濃度の上昇は、心筋梗塞, 筋ジストロフィ-, 甲状腺機能亢進症, 肺梗塞や脳血管性疾患に関連しています。こうした疾患の診断においては、相対的なアイソザイムの分布の違いも判断材料になります。

基質:クレアチン, N-エチルグリコシアミン, グリコシアミンが基質として作用することが示されています。ATP/ADPに対して非常に特異的です。

阻害剤:ADPは正反応においてATPと競合する強力な阻害剤です。Ca²⁺(K_i = 4.5 mM), Zn²⁺やCu²⁺といった二価の陽イオンは、 Mg²⁺と競合することによりクレアチンホスホキナ-ゼを阻害します。その他の阻害剤としては、酢酸, アセチルサリチル酸, アデノシン, p-アミノサリチル酸, AMP, 安息香酸, 炭酸水素, 臭化物, 塩化物, p-クロロ水銀安息香酸, エチレンオキシド, 2,4-フルオロジニトロベンゼン, ヨウ化物, マロン酸, NAD, 硝酸, リン酸, ピロリン酸, サリチル酸, 硫酸, 亜硫酸, チロキシン, トリクロロ酢酸, L-トリヨウ化チロキシン, L-トリヨウ化サイロニン, トリポリリン酸などがあります。

希釈による不活性化を避けるため、反応バッファ-には0.1%アルブミンを添加することをお勧めします。

1ユニットは、pH 7.4、30°C、1分間で、1.0 μmolのリン酸をホスホクレアチニンからADPへと転移させる酵素量です。

0.25 Mグリシル-グリシン中5 mg/mL、pH 7.4で、透明、無色～淡黄色の溶液を生成します。