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Merck

D4527

デオキシリボヌクレアーゼ I ウシ膵臓由来

Type II, lyophilized powder, Protein ≥80 %, ≥2,000 units/mg protein

別名:

DNase I, デオキシリボ核酸 5′-オリゴヌクレオチド-ヒドロラーゼ

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この商品について

CAS番号:
UNSPSC Code:
12352204
NACRES:
NA.54
EC Number:
232-667-0
MDL number:
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製品名

デオキシリボヌクレアーゼ I ウシ膵臓由来, Type II, lyophilized powder, Protein ≥80 %, ≥2,000 units/mg protein

biological source

bovine pancreas

type

Type II

form

lyophilized powder

specific activity

≥2,000 units/mg protein

mol wt

~31 kDa

purified by

chromatography

composition

Protein, ≥80%

technique(s)

DNA extraction: suitable

solubility

0.15 M NaCl: soluble 5.0 mg/mL, clear

suitability

suitable for molecular biology

application(s)

diagnostic assay manufacturing
diagnostic assay manufacturing

foreign activity

Chymotrypsin ≤0.01%
Protease ≤0.005%
RNase ≤0.01%

shipped in

wet ice

storage temp.

−20°C

Quality Level

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Analysis Note

タンパク質はビウレット法で測定。

Application

DNアーゼIは、DNAにラベル化した塩基を取り込むための最初のステップとして、ニックDNAに使用されます。Sigmaの本酵素は、メイディン・ダービー・イヌ腎臓(MDCK)II細胞株の細胞ライセートの調製において、ヌクレアーゼストックとしてRNアーゼとともに使用されています。また、シンドビスウイルスからのRNAの抽出にも使用されています。
ウシ膵臓由来デオキシリボヌクレアーゼIは、デオキシリボヌクレアーゼIに類似した2つの新たなヒト遺伝子の同定、位置決定、および発現に使用されています。また、ウシ膵臓由来デオキシリボヌクレアーゼIは、ウシ膵臓由来の高活性RNアーゼ、DNアーゼ、コレステロールエステラーゼ、およびトリプシンを得るための新しいアプローチの検討にも使用されています。
タンパク質サンプルからDNAを除去する際に使用します。

Biochem/physiol Actions

DNアーゼIは、ピリミジンに隣接するホスホジエステル結合に作用して、末端に5'-リン酸を持ったポリヌクレオチドを生成するエンドヌクレアーゼです。DNアーゼIは、Mg2+の存在下、DNAの各鎖を独立して切断し、その切断場所はランダムです。両方のDNA鎖は、Mn2+存在下、ほとんど同じ場所で切断されます。至適pHは7~8であることが分かっています。Mn2+、Ca2+、Co2+、およびZn2+などの二価カチオンは、酵素を活性化します。5 mMのCa2+は、プロテアーゼ消化に対して酵素を安定化します。ウシ膵臓由来DNアーゼIは、クロマトグラフィーによって区別される4つのコンポーネント A、B、CおよびDからなり、それらのモル比はそれぞれ、4:1:1です。Dは少量だけ含まれます。2-メルカプトエタノール、キレート剤、ドデシル硫酸ナトリウム(SDS)およびアクチンは、酵素活性を阻害することが知られています。

Features and Benefits

DNAニッキングと タンパク質サンプルからのDNAの除去に有効です

Other Notes

1 Kunitz単位は、タイプIまたはIIIのDNAを基質に使用して、pH 5.0、25°C、1 mLで、1分間に0.001のA260における吸光度変化を生成します。

Physical form

塩化カルシウムを含有

Preparation Note

酵素粉末は、水か、リン酸バッファー以外のバッファー(pH 4.0~9.0)に溶解できます。カルシウムのキレート剤は避けてください。0.15 MのNaClに溶解したDNアーゼIの10 mg/mL溶液のアリコートを-20°Cで1週間保存した場合、10%以下の活性が失われることがあります。同様の溶液を2~8°Cで保存した場合、約20%の活性が失われます。pH 5~7、60°Cでは、5時間まで活性が維持され、68°Cでは10分以下で活性が消失します。1 mg/mLの濃度で、酢酸バッファー(pH 5.0)およびトリスバッファー(pH 7.2)中では、1時間あたり6%の速さで活性が失われます。

pictograms

Health hazard

signalword

Danger

hcodes

Hazard Classifications

Resp. Sens. 1

保管分類

11 - Combustible Solids

wgk

WGK 3

flash_point_f

Not applicable

flash_point_c

Not applicable


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