D5025
デオキシリボヌクレアーゼ I ウシ膵臓由来
Type IV, lyophilized powder, ≥2,000 Kunitz units/mg protein
別名:
DNase I, デオキシリボ核酸 5′-オリゴヌクレオチド-ヒドロラーゼ
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この商品について
CAS番号:
UNSPSC Code:
12352204
NACRES:
NA.54
EC Number:
232-667-0
MDL number:
製品名
デオキシリボヌクレアーゼ I ウシ膵臓由来, Type IV, lyophilized powder, ≥2,000 Kunitz units/mg protein
biological source
bovine pancreas
type
Type IV
form
lyophilized powder
specific activity
≥2,000 Kunitz units/mg protein
mol wt
~31 kDa
purified by
chromatography
composition
Protein, ≥80%
technique(s)
DNA purification: suitable
solubility
0.15 M NaCl: soluble 5.0 mg/mL, clear, colorless
suitability
suitable for molecular biology
application(s)
diagnostic assay manufacturing
diagnostic assay manufacturing
foreign activity
Chymotrypsin ≤0.5%
Protease ≤0.05%
RNase ≤0.02%
shipped in
wet ice
storage temp.
−20°C
Quality Level
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Analysis Note
ビウレット法により定量したタンパク質。
Application
DNアーゼIは、DNAにラベル化した塩基を取り込むための最初のステップとして、ニックDNAに使用されます。Sigmaの本酵素は、ラット脳組織の処理に使用されています。この研究は、アストロサイトの軸索伸長が、オリゴデンドロサイトによって阻害されないことを示しました。別の研究では、融解したE. coliの固定化サンプルが、他の酵素と共にSigmaのDNアーゼIで消化されています。この消化は、透過処理および核酸染色の前に行われています。
ウシ膵臓由来デオキシリボヌクレアーゼIは、枯草菌中のヌクレアーゼの二次元ザイモグラム解析の研究に使用されています。また、ウシ膵臓由来デオキシリボヌクレアーゼIは、マイナー溝結合タンパク質RecAおよびデオキシリボヌクレアーゼIのDNA会合における、マイナーおよびメジャー溝結合薬物およびインターカレーターの効果を調べる研究にも使用されています。
タンパク質サンプルからDNAを除去する際に使用します。
Biochem/physiol Actions
DNアーゼIは、ピリミジンに隣接するホスホジエステル結合に作用して、末端に5'-リン酸を持ったポリヌクレオチドを生成するエンドヌクレアーゼです。DNアーゼIは、Mg2+の存在下、DNAの各鎖を独立して切断し、その切断場所はランダムです。両方のDNA鎖は、Mn2+存在下、ほとんど同じ場所で切断されます。至適pHは7～8であることが分かっています。Mn2+、Ca2+、Co2+、およびZn2+などの二価カチオンは、酵素を活性化します。5 mMのCa2+は、プロテアーゼ消化に対して酵素を安定化します。ウシ膵臓由来DNアーゼIは、クロマトグラフィーによって区別される4つのコンポーネントA、B、CおよびDからなり、それらのモル比は、4：1：1です。Dは少量だけ含まれます。2-メルカプトエタノール、キレート剤、ドデシル硫酸ナトリウム（SDS）およびアクチンは、酵素活性を阻害することが知られています。
Other Notes
1 Kunitz単位は、タイプIまたはIIIのDNAを基質に使用して、pH 5.0、25°C、1 mLで、1分間に、0.001のA260における吸光度変化を生成します。
Physical form
塩化カルシウムを含む凍結乾燥粉末
Preparation Note
0.15 MのNaClに溶解したDNアーゼIの10 mg/mL溶液のアリコートを-20°Cで1週間保存した場合、10％以下の活性が失われることがあります。同様の溶液を2～8°Cで保存した場合、約20％の活性が失われます。pH 5～7、60°Cでは、5時間まで活性が維持され、68°Cでは10分以下で活性が消失します。1 mg/mLの濃度で、酢酸バッファー（pH 5.0）およびトリスバッファー（pH 7.2）中では、1時間あたり6％の速さで活性が失われます。
signalword
Danger
hcodes
pcodes
Hazard Classifications
Resp. Sens. 1
保管分類
11 - Combustible Solids
wgk
WGK 3
flash_point_f
Not applicable
flash_point_c
Not applicable
Enzymes of Molecular Biology
Weir, A. F.
Methods in Molecular Biology, 16 (1993)
J W Fawcett et al.
Journal of cell science, 103 ( Pt 2), 571-579 (1992-10-01)
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Applied and environmental microbiology, 63(11), 4608-4611 (1997-11-15)
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Sambrook, J., and Russell, D.W.
Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2(2), 5-5 (2001)
プロトコル
To standardize a procedure for the enzymatic assay of Deoxyribonuclease I.
ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.
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