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この商品について
CAS番号:
UNSPSC Code:
12352204
NACRES:
NA.54
EC Number:
232-650-8
MDL number:
製品名
トリプシン ウシ膵臓由来, TPCK Treated, essentially salt-free, lyophilized powder, ≥10,000 BAEE units/mg protein
biological source
bovine pancreas
sterility
aseptically filled
form
essentially salt-free, lyophilized powder
specific activity
≥10,000 BAEE units/mg protein
mol wt
23.8 kDa
composition
protein, ≥95%
solubility
hydrochloric acid: soluble 1 mM, clear
foreign activity
Chymotrypsin ≤0.1 BTEE units/mg protein
storage temp.
−20°C
Quality Level
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Analysis Note
タンパク質量は、E1%/280で求めました。
Application
トリプシンを使用すると、継代培養のために組織培養プレートから接着細胞を放出できます。トリプシンは、ヒトのα-ラクトアルブミンの構造安定性に対する高分子混雑の影響を評価する研究に使用されています。トリプシンは、トリコデルマハルジアナムセクレトームのBN-PAGE分析を調査する研究にも使用されています。
ペプチドのトリプシン消化には、トリプシン:ペプチドに対して約1:100から1:20の比率を使用します。この製品の一般的な用途は、培養表面から接着細胞を除去することです。基質から細胞を取り除くのに必要なトリプシンの濃度は、主に細胞の種類と培養期間に依存します。トリプシンは、細胞培養中の細胞の再懸濁、タンパク質の消化のためのプロテオミクス研究、および様々なゲル内消化にも使用されています。その他の用途には、膜ベースの手法による結晶化の評価や、タンパク質フォールディング速度と収量が動的トラップの存在によって制限されうることを確認する研究が含まれます。
Biochem/physiol Actions
トリプシンは、リジンおよびアルギニン残基のC末端側のペプチドを切断します。酸性残基が切断部位の両側にある場合、この反応の加水分解速度は遅くなり、プロリン残基が切断部位のカルボキシル側にある場合、加水分解は停止します。トリプシン活性の至適pHは7~9です。また、トリプシンは、アミノ酸の合成誘導体のエステルおよびアミド結合を切断するよう作用します。EDTAは、トリプシンが作用するペプチド結合を不明瞭にするカルシウムおよびマグネシウムイオンを中和するキレート剤としてトリプシン溶液に添加されます。これらのイオンを除去すると、酵素活性が増加します。
DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF、およびアプロチニン等を含むセリンプロテアーゼ阻害剤がトリプシンを阻害します。
DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF、およびアプロチニン等を含むセリンプロテアーゼ阻害剤がトリプシンを阻害します。
General description
トリプシン分子は2つのドメインを持ち、1つは酵素の活性部位とトリプトファン残基に関連し、もう1つは8-アニリノナフタレン-1-スルホン酸の結合に関連します。
Other Notes
1 BAEEユニットは、基質としてBAEEを用いたとき、pH 7.6、25°C、1分間で、ΔA253が0.001となる酵素量です。反応容量 = 3.2 mL(光路長1 cm)。
より詳細な情報につきましては、 www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorerのtrypsin をご覧ください。
基質として1単位のBAEEを使用したとき、pH 7.6、25°CにおけるA253は0.001/分となります。
Preparation Note
TPCK処理済み
signalword
Danger
hcodes
Hazard Classifications
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
target_organs
Respiratory system
保管分類
11 - Combustible Solids
wgk
WGK 1
ppe
dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves
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プロトコル
Continuous spectrophotometric rate determination method using BAEE substrate measures trypsin activity, essential for enzyme characterization.
ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.
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