コンテンツへスキップ
Merck
ホーム分子診断用Ultra pure PCRソリューションによる信頼性の高い結果の達成

分子診断用Ultra pure PCRソリューションによる信頼性の高い結果の達成

分子診断学入門

分子診断学は、新興疾患の検出と治療に不可欠なツールを提供する、急速に発展している分野です。 COVID-19 の大流行は、正確で信頼性の高い診断検査ソリューションの必要性を強調し、医療従事者が直面する特有の課題を浮き彫りにしました。 分子診断学が進化し続けるにつれて、高品質のPCR試薬の需要はますます不可欠になっています。 私たちのUltra pure ポートフォリオは、DNA、ニッカーゼ、DNase、RNaseによるコンタミネーションを最小限に抑えるため、M-Clarity品質レベル300(MQ-300)で細心の注意を払って精製された製品を特徴としています。 この厳格な精製プロセスにより、誤った結果が生じるリスクが大幅に軽減され、研究者や臨床医は診断結果に自信を持てるようになります。

精度を高めるUltra pure RT-PCR試薬

私たちのUltra pure RT-PCR試薬は、最高水準の純度を満たすように特別に設計されており、診断検査に影響を与える可能性のあるDNA、Dnase、RNase、ニッカーゼによる汚染がありません。 これらの高性能PCR試薬は、さらに精製され、高感度qPCRアッセイを用いた厳密な試験を経て、誤った結果を生じにくいことが保証されています。 この卓越した品質は、16S、18Sおよび複製DNAの起点をターゲットとするユニバーサルプライマーを使用することで実現されており、リアルタイムPCRアプリケーションにおける正確な増幅に不可欠です。

私たちのRT-PCR試薬のDNA基準は以下の通りです:

  • 原核生物DNA:ユニバーサル16Sプライマーを用い、大腸菌gDNA 1コピー以下で原核生物ゲノム514,172個を検出。
  • 真核生物DNA:ユニバーサル18Sプライマーを用い、ヒトgDNA 0.1コピー以下で110,032の真核生物ゲノムを検出。
  • プラスミドDNA: ユニバーサル複製起点プライマーを用い、10コピー以下で25,920のユニークなプラスミドを検出。

Ultra pure JumpStart™ Taq DNA Polymerase:高性能ソリューション

Ultra pure JumpStart™ Taq DNAポリメラーゼ(UPJSTAQ)は、厳格なMQ-300要件の下で細心の注意を払って製造され、PCRベースの検査に影響を与えることが知られている汚染物質の最低レベルを保証します。 この高品質のDNAポリメラーゼは偽陽性のリスクを大幅に低減し、信頼性の高い分子診断に不可欠なコンポーネントとなっています。 UPJSTAQは、標準的なJumpStart™ Taq DNA Polymerase(JSTaq)と同じ卓越した性能を維持し、標的収量を増加させながら非特異的増幅を最小限に抑えるように設計された抗体不活性化ホットスタート機構を特徴としています。 この抗体-酵素複合体は、マニュアルのホットスタート技術と比較して、汚染のリスクが低く、簡単かつ便利なセットアップが可能になります。

厳格なUPJSTAQのDNA除去プロセスと検査プロトコルは、製造中にしばしば混入する宿主由来のDNAや環境汚染物質の不存在を保証します。 これらの厳格な仕様により、DNAフリーのUltra pure JumpStart™ Taqが高感度分子アッセイに干渉しないことが保証されます。 この能力は、図1.に示すように、貴重な鋳型を保存し、鋳型なし対照(NTC)における増幅を大幅に低減するために極めて重要です。

高性能PCR試薬を強調した、ノーテンプレート対照(NTC)に対するUPJSTaqの増幅率低下を示すグラフ

図1:UPJSTaqはノーテンプレート対照(NTC)における増幅の減少を示す。

JSTaq 18SのRFU対サイクルのグラフ。NTCや低存在量のターゲットが不明瞭で、PCRの分解能に影響を及ぼしていることがわかる。

図2:JSTaqはDNAコンタミネーションを防ぐように設計されていないため、NTCや低アバンダンスのターゲットが不明瞭になり、低ターゲット領域での分離能が損なわれる可能性がある。

私たちの標準的なJSTaqとPCR試薬は、DNA汚染を防ぐために特別に設計されているわけではありませんが、DNA汚染がそれほど懸念されない研究段階には適しています。 一方で、私たちのUltra pure製品は、よりクリーンな試薬や酵素が不可欠な製造段階のお客様に向けて製造しています。

UPJSTAQは、NTCと低アバンダンスターゲットが区別できなくなるリスクを最小限に抑え、低ターゲット領域での分離能の低下を招きます(図2を参照)。 この制限はアッセイの感度に大きく影響します。 これがUPJSTAQを偽陽性や偽陰性のリスクを最小限に抑える必要のある診断アッセイに理想的な選択にしている理由です。

Ultra pure JumpStart™ Taq DNAポリメラーゼを選択することで、科学者はPCR増幅の信頼性を高めることができ、リアルタイムPCR装置やRT-qPCRアッセイを含むさまざまな分子生物学アプリケーションにおいて、正確で再現性の高い結果を得ることができます。

Ultra pure PCR試薬:診断検査ソリューションの最適化

分子診断で最高の精度を達成するには、Ultra pure JumpStart™ Taq DNA Polymerase (UPJSTAQ) をUltra pure PCR buffersと組み合わせて使用する必要があります。 この組み合わせにより、PCR検査のセットアップ全体が細心の注意を払って最適化され、偽陰性や偽陽性のリスクを最小限に抑えることができます。 10X PCR緩衝液、MgCl₂、およびDNAフリー水は、アッセイの完全性を維持するために重要な環境DNA汚染を除去するために特別に処理されています。 これらの高感度で高品質なPCR試薬の使用は、さまざまなDNA汚染物質が効果的に除去されていることを保証し、それによってこれらの試薬がqPCRアッセイやRT-PCRアプリケーションのような高感度分子アッセイに干渉しないことを保証します(図3参照)。

UPMGCL2(16S)のRFU対サイクルを示すグラフ。高感度アッセイ用のDNAフリーPCR試薬であることを示す。

図3:DNAを含まないPCR試薬は、高感度アッセイに干渉しない可能性が高い。

他の市販のMgCl2 (16S)のRFU対サイクルのグラフで、汚染されたDNAによる偽陽性を強調している。

図4:他のMgCl2は、汚染されたDNAを運ぶ場合、偽陽性のリスクが高まる可能性がある。

コンタミネーションのないPCR増幅を保証

残留核酸による汚染は、低存在量の標的を不明瞭にし、偽陽性をもたらし、診断アッセイの特異性を低下させる可能性があるため、DNAフリーのPCR試薬を使用することの重要性はいくら強調してもし過ぎることはありません。 私たちの高感度qPCRアッセイは、これらの課題に対処するために設計されており、PCR増幅において最高品質の試薬のみが使用されることを保証しています。 図3に示されているように、DNAを含まないPCR試薬は高感度アッセイに干渉しない確率が著しく高く、これは分子生物学アプリケーションにおいて正確な結果を得るために重要です。

PCR添加剤は汚染DNAやヌクレアーゼを運ぶ可能性があり、偽陽性や偽陰性のリスクをさらに高めます(図4参照)。 Ultra pure PCR試薬を選択することで、科学者はこれらのリスクを効果的に軽減し、診断検査ソリューションの信頼性を高め、リアルタイムPCR装置での正確な検出を確実にすることができます。

結論:分子診断学の進歩

結論として、Ultra pure JumpStart™ Taq DNA PolymeraseとUltra pure PCR試薬の導入は、分子診断学の分野における重要な進歩を意味します。 厳格な精製プロセスによりコンタミネーションを最小限に抑えたこれらの高性能PCR試薬は、PCRベースのアッセイの信頼性と感度を高めます。 このような品質へのこだわりは、DNAシーケンシングやその他の分子生物学的アプリケーションにおける正確な結果をサポートするだけでなく、診断検査の結果に対する信頼性を育みます。

製品リスト

Loading