Anticuerpo anti-fosfotirosina, clon 4G10 ^®

Alguno de los restos de tirosina pueden ser etiquetados con un grupo fosfato (fosforilados) por las proteínas cinasas. (En su estado fosforilado, se la denomina fosfotirosina.). La fosforilación de las tirosinas se considera una de las etapas fundamentales en la transducción de la señal y la regulación de la actividad enzimática.
La introducción de los anticuerpos anti-fosfotirosina es uno de los eventos significativos en la investigación de la transducción de la señal. Antes de que se dispusiera de anticuerpos anti-fosfotirosina, la tirosil fosforilación de proteínas y enzimas se investigaba mediante peligrosos y largos experimentos radioactivos. Los anticuerpos anti-fosfotirosina se utilizan normalmente en la inmunoelectrotransferencias después de la inmunoprecipitación de las proteínas marcadas para medir la tirosil fosforilación de las proteínas. Los anticuerpos anti-fosfotirosina se utilizan también directamente en el lisado celular para examinar el cambio global del nivel de fosforilación de tirosinas en respuesta a varios tratamientos.

Depende del peso molecular de la proteína con tirosinas fosforiladas que vaya a detectarse.

Fosfotiramina-KLH

Categoría investigación
Comunicación molecular

El anticuerpo anti-fosfotirosina, clon 4G10, detecta las proteínas con tirosina fosforilada en todas las especies. Este exclusivo anticuerpo monoclonal se ha validado para su utilización en IC, IH, IP, WB y está respaldado por centenares de publicaciones

Inmunoprecipitación:
2-4 μg de un lote anterior inmunoprecipitó cuantitativamente las proteínas que contenían fosfotirosina en el lisado de un cultivo confluente (placa de 10 cm) de células que expresaban una tirosina cinasa activada. Para conservar la fosfotirosina, añada: ortovanadato de sodio 0,2 mM a la disolución tampón de lisis.

Subcategoría de investigación
Modificación postraduccional general

Este anticuerpo reconoce las proteínas tirosina fosforiladas de todas las especies.

Cromatografía en G-Sepharose de proteínas

IgG2bκ monoclonal de ratón purificada en tampón que contiene Tris-glicina 0,1 M (pH 7,4), NaCl 0,15 mM, azida sódica al 0,05 %. Líquido a 2-8ºC.
Anticuerpo monoclonal de ratón IgG2bκ producido in vitro por hibridoma ratón-ratón 4G10 (FOX-NY [NS-1 derivado] mieloma x células de bazo).

Presentación: Purificada

Estable durante 1 año a 2-8°C desde la fecha de recepción.
NOTA: NO CONGELAR.
Para la recuperación máxima del producto, debe centrifugarse el vial original antes de retirar la tapa. Si el producto se ha congelado y descongelado accidentalmente, centrifúguelo a 13.000 g durante 10 minutos a 2-8ºC. Guarde el sobrenadante para la aplicación.

Control
Control de antígeno positivo: nº de referencia 12-302, lisado de células A431 estimuladas por EGF. Agregue 2,5 µl de 2-mercaptoetanol/100 µl de lisado y déjelo hervir durante 5 minutos para reducir la preparación. Cargue 20 µg del lisado reducido por carril para minigeles.

Evaluado sistemáticamente en células de carcinoma A431 humanas tratadas con EGF.

Análisis mediante inmunoelectrotransferencia:
0,5-2 μg/ml de este lote detectaron proteínas tirosina-fosforiladas en un lisado RIPA modificado de células de carcinoma A431 humano tratadas con EGF (Cohen, B., 1990; , Druker, B. J., 1989; Kanakura, Y., 1991).

Concentración: Para conocer la concentración específica del lote, consulte el certificado de análisis.

4G10 is a registered trademark of Upstate Group, Inc.

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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