Anticuerpo anti-fosfo-histona H3 (Ser10), clon 3H10

Control
Extractos de células 293 tratadas con rayos UV, extractos de células HeLa tratados con rayos UV, tejido neoplásico mamario y extractos de células HEPG2.

Evaluada habitualmente mediante Western blot de proteínas extraídas con ácido de células HeLa en mitosis tratadas con colcemid (Nº de ref. 17-306).

Análisis mediante inmunoelectrotransferencia (WB):
0,05-0,5 μg/ml de este lote detectaron la histona H3 fosforilada en proteínas extraídas con ácido de células HeLa mitóticas tratadas con colcemid (Nº de ref. 17-306), pero no histona H3 recombinante no modificada (Nº de ref. 14-494) (Figura A).

Citometría de flujo:
un laboratorio independiente ha informado de que este anticuerpo detecta la histona H3 fosforilada cuando se utiliza citometría de flujo.

Análisis de especificidad histona-péptido Beadlyte:
se incubaron diluciones 1:1 000-1:81 000 de un lote previo con histonas H3 que contenían diversas modificaciones conjugadas con microesferas Luminex. (Figura B). Sólo se detectó el péptido que contenía la fosfo-serina 10.


Inmunocitoquímica:
0,2 μg/ml de un lote anterior demostraron inmunotinción cromosómica positiva para las células A431 y HeLa mitóticas fijadas con etanol al 95 % y ácido acético al 5 % y permeabilizadas con Triton X-100 al 0,1 %.

Análisis de inhibición peptídica:
la detección de la histona H3 mediante inmunotransferencias de extractos ácidos de HeLa tratadas con colcemid con un anti-fosfo-histona H3 (Ser10) se redujo en 10 μM de péptido histona H3 que contenía fosfo-serina 10, pero no con péptidos que contenían fosfo-serina 28 o una secuencia de histona H3 no modificada (Figura C).

Inmunofluorescencia:

El anticuerpo anti-fosfohistona H3 (Ser10), clon 3H10, es un anticuerpo monoclonal de ratón para la detección de la histona H3 fosforilada en la serina 10. Este AcM purificado, también conocido como H3S10p, se ha publicado en revistas con revisión científica externa y ha sido validado en FC, ICC, IF, PIA, WB, Mplex.

Histona H3 fosforilada en la Ser10.

Se prevé amplia reactividad cruzada entre especies.

La listona H3 es una de las cinco proteínas histonas principales implicadas en la estructura de la cromatina de las células eucariotas. Caracterizada por un dominio globular principal y una larga cola N terminal, la H3 participa en la estructura de ′collar de perlas′ de los nucleosomas. La cola N-terminal de la histona H3 sobresale del centro globular del nucleosoma y puede experimentar varios tipos diferentes de modificaciones epigenéticas que influyen en los procesos celulares. Entre estas modificaciones se cuentan la unión covalente de grupos metilo o acetilo a los aminoácidos lisina y arginina y la fosforilación de la serina o la treonina.

17 kDa

Concentración: Para conocer la concentración específica del lote, consulte el certificado de análisis.

IgG1k de ratón purificada en tampón que contiene Tris-glicina 0,1 M (pH 7,4), NaCl 0,15 mM con acida sódica al 0,05 %.

Presentación: Purificada

Estable durante 1 año entre 2 y 8°C desde la fecha de recepción.

Recomendaciones de manipulación:
Tras su recepción, y antes de quitar la tapa, centrifugue el vial y mezcle suavemente la disolución. Distribúyalo en alícuotas en tubos de microcentrífuga y guárdelo a -20°C. Evite ciclos repetidos de congelación y descongelación que pueden dañar la IgG y afectar al rendimiento del producto. Nota: la variabilidad en las temperaturas del congelador por debajo de -20°C puede hacer que las disoluciones que contienen glicerol se congelen durante el almacenamiento.

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany