General description
53-56 kDa
El MiTF (factor de transcripción asociado a la microftalmia) es un factor de transcripción básico hélice-bucle-hélice-cremallera de leucina (b HLH ZIP) implicado en la pigmentación, los mastocitos y el desarrollo óseo. Las mutaciones en MiTF causan síndromes pigmentarios-auditivos, como el síndrome de Waardenburg tipo II, tipo IIa y el síndrome de Tietz en humanos. Se conocen dos isoformas del MiTF que difieren en 66 aminoácidos en el extremo NH2 terminal. Las formas más cortas se expresan en los melanocitos y corren como dos bandas en 52 kDa y 56 kDa, mientras que la forma Mi más larga corre como un grupo de bandas en 60-70 kDa en los osteoclastos y en las células de melonoma B16 (pero no en otras líneas celulares de melanoma), así como en los mastocitos y las células cardiacas. El MiTF desempeña un papel fundamental en la diferenciación de varios tipos de células como los melanocitos derivados de la cresta neuronal, los mastocitos, los osteoclastos y el epitelio pigmentario retiniano derivado de la cúpula óptica. El Mi es un factor de transcripción básico hélice-bucle-hélice-cremallera de leucina (b-HLH-ZIP) implicado en la pigmentación, los mastocitos y el desarrollo óseo. La mutación del Mi causa el síndrome de Waardenburg tipo II en humanos. En ratones, provoca una pérdida profunda de células pigmentadas en el ojo y el oído interno, así como osteopetrosis y defectos en los mastocitos y las células K. Se ha demostrado mediante cartografía tríptica bidimensional que estas isoformas melanocíticas difieren en la fosforilación inducida por c-Kit. La cepa osteoporótica de rata alberga una gran deleción genómica que abarca la mitad 3′ del Mi, incluida la mayor parte de la región b-HLH-ZIP. Los osteoclastos de estos animales carecen de proteína Mi, en contraste con los osteoclastos nativos de rata, ratones y humanos.
Immunogen
Hibridoma producido por la fusión de esplenocitos de ratones RBF/DnJ inmunizados con un fragmento N-terminal de proteína de microftalmia humana y de células de mielona NS1 de ratón.
Application
El anticuerpo anti-microftalmia (Mi), clon C5, es un anticuerpo monoclonal de ratón para la detección de la microftalmia (Mi), también conocido como factor de transcripción asociado a la microftalmia y se ha probado en EMSA, IHC, IHC(P), IP y WB.
Inmunoprecipitación:
Se utilizó un lote anterior de este anticuerpo en IP. (2 µg/mg de lisado proteico)
Ensayos de superdesplazamiento en gel:
Se utilizó un lote anterior de este anticuerpo en EMSA.
Inmunohistoquímica (parafina):
Se utilizó un lote anterior de este anticuerpo en IH en cortes de tejido congelados y en formol/parafina.
El usuario debe determinar las diluciones de trabajo óptimas.
Biochem/physiol Actions
En inmunoelectrotransferencia (Western blot), reconoce un doblete de 52-56 kDa, identificado como formas serina-fosforiladas y no fosforiladas de las isoformas melanocíticas de la microftalmia (Mi). Se conocen dos isoformas de la Mi que difieren en 66 aminoácidos en el extremo NH2 terminal. Las formas más cortas se expresan en los melanocitos y corren como dos bandas en 52 kDa y 56 kDa, mientras que la forma Mi más larga corre como un grupo de bandas en 60-70 kDa en los osteoclastos y en las células de melonoma B16 (pero no en otras líneas celulares de melanoma), así como en los mastocitos y las células cardiacas. Reacciona con las isoformas tanto melanocíticas como no melanocíticas de la Mi. Este Ac no experimenta reacción cruzada con otros factores b-HLH-ZIP mediante el ensayo de desplazamiento de la movilidad del ADN.
Physical form
IgG1 monoclonal de ratón purificada en tampón fosfato salino con azida sódica al 0,08 %.
Presentación: Purificada
Preparation Note
Estable durante 1 año a -20ºC en alícuotas no diluidas desde la fecha de recepción.
Recomendaciones de manipulación: Tras su recepción, y antes de quitar la tapa, centrifugue el vial y mezcle suavemente la disolución. Distribúyalo en alícuotas en tubos de microcentrífuga y guárdelo a -20°C. Evite ciclos repetidos de congelación y descongelación que pueden dañar la IgG1 y afectar al rendimiento del producto.
Analysis Note
Control
Células de melanoma humano Mel 501, osteoclastos nativos humanos, de rata y ratón .
Evaluada sistemáticamente mediante transferencia Western en lisados cerebrales de ratón.
Análisis mediante inmunoelectrotransferencia:
Una dilución 1:500 de este lote detectó Mi en 10 μg de lisados de cerebro de ratón.
Other Notes
Concentración: Para conocer la concentración específica del lote, consulte el certificado de análisis.
Legal Information
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany